
標本的采集
一般生化檢驗采集早晨空腹的靜脈血,在采血前禁食8-12小時;
需要不抗凝血的項目,采取規(guī)定的血量注入潔凈干燥的試管中,室溫放置待血液凝固后分離血清;
需要抗凝血的項目,一定要看清楚是用哪種抗凝管,需要的血量是多少,注入試管后要充分搖勻,以達到抗凝的目的,特別是專用抗凝管的項目;
防污染的項目在采集標本的時候要注意無菌操作,有些項目還要在厭氧的環(huán)境下操作;
尿液檢測需要采集新鮮的中段尿,做生化檢測時需加入相應(yīng)的防腐劑。

采集血標本的注意事項
為了減少由于采血時間而造成的檢驗結(jié)果波動,每次采血最好固定在同一時間進行;
從臥位到直立位,有些項目所采血液標本的測定值有升高的趨勢;
止血帶壓脈時間不能太長,過長易引起多種成分的改變及血管內(nèi)溶血;
紅細胞中許多成分的濃度比血清中的高幾倍或幾十倍,溶血可影響該成分的分析;
注射器及針頭要潔凈干燥無菌,最好選用一次性注射器;
抽血時針筒內(nèi)產(chǎn)生的氣泡不要注入試管中,否則易引起溶血;
采血后要及時分離血清,分離血清時離心速度不宜過高,離心時間不宜太長;
避免在輸液、吃藥時抽血作為待檢標本;
血液標本若不能及時送檢,應(yīng)分離血清或血漿放4℃保存。

抗凝劑的選擇
肝素:一種較常用的抗凝劑,常用于血氣分析和部分生化項目測定1g/L的肝素溶液0.5ml可使5ml血液不會發(fā)生凝固;
EDTA·Na2或EDTA·K2:用于血液細胞分析和血細胞比容測定1.5-2.2mgEDTA可阻止1ml血液凝固;
草酸鉀-氟化鈉:主要用于測定血糖時使用,因氟化鈉可抑制紅細胞無氧酵解,使血標本中葡萄糖水平在2-3天內(nèi)保持不變;
枸櫞酸鈉:枸櫞酸鈉溶液常用于凝血因子(PT,APTT)檢查,抗凝劑與血液比為1:9。用于血沉試驗為0.4ml枸櫞酸鈉溶液加1.6ml血液。

尿標本常用防腐劑
濃鹽酸用量0.5-1.0ml/100ml尿液,適用于尿兒茶酚胺、香草扁桃酸(VMA),17-羥和17-酮類固醇等24小時尿定量測定;
甲苯用量0.5-1.0ml/100ml尿液,適用于尿肌肝、尿糖、蛋白質(zhì)、丙酮等測定;
冰醋酸用量5-10ml/24小時尿液,適用于24小時尿醛固酮測定;
甲醛用量0.2-0.5ml/100ml尿液,具有防腐和固定尿中有形成分的作用,用于尿液中細胞與管型的保存。常用于24小時尿沉渣計數(shù)(Addis)測定。

特殊標本的采集要求
1、高血壓三項:
(1)AⅠ、AⅡ(血管緊張素AⅠ、AⅡ)共用5ML。
取肘靜脈血5ML,迅速注入放在冷水中冷卻的抗凝管內(nèi),搖勻。即刻再放回冷水中冷卻,等到離心時取出。100轉(zhuǎn)/5分鐘(最好在4℃離心)分離血漿。此操作應(yīng)在15分鐘內(nèi)完成。而后,血漿放低溫冰箱保存(–20℃以下)可用2個月;
(2)ALD(醛固醇)3ML血量,用肝素抗凝,1ML血漿中加10uL肝素注射液(1250單位)ALD分離與存放,同血管緊張素同一條件。臥位:晨:6:00-8:00;立位:起床后3小時采血;
(3)B-阻斷劑,血管擴張劑,利尿劑及甾體激素,甘草等影響體內(nèi)腎素水平,一般要停藥后兩周測定血管緊張素,利血平等代謝的藥物應(yīng)停藥后的三周測定。不適停藥的病有應(yīng)改胍乙定等影響血管緊張素較小的降壓藥;
(4)鈉攝入量影響血管緊張素水平,故測定血管緊張素三天前減少食鹽攝入量;
(5)放特殊性管顛倒混勻立即放低溫送檢,注明是否低鹽飲食。
2、24小時尿蛋白定量
收集24h尿液,用5-10ml甲苯防腐,記下總量,混勻取5ml送檢。
3、糖耐量試驗(胰島素釋放試驗C-P釋放試驗)
(1)病人準備:試驗前3日,每日進食碳水化合物不低于250-300克,且維持正;顒,影響實驗的藥物要在3日前停用,試驗前10-16小時患者不能進食;
(2)標本采集:臨床上常用的方法是清晨抽空腹血后,口服100克葡萄糖后半小時,1、2、3小時各取血一次(共5次);
(3)標本保存:采血后1小時內(nèi)分離血清并2-8℃保存送檢。
4、尿兒茶酚氨
收集24h尿液,用5-10ml濃鹽酸防腐,記下總量,混勻取5-10ml送檢。注意留尿前禁用類固醇激素,中藥、有色藥、激素、降壓藥、鎮(zhèn)靜等藥物。留尿標本前,停服任何藥物后3天。
血兒茶酚胺(多巴胺、腎上腺素、去甲腎上腺素):須停用中藥、有色素藥、香蕉、茶葉及巧克力三天以上(最好是臨床癥狀最明顯時如血壓最高時抽血),抽血2ML用血常規(guī)管,抗凝后快速分離血漿送檢。(1小時內(nèi)分離)。
5、促腎上腺皮激素(ACTH):血常規(guī)管抽血2ML顛倒混勻全血,分離血漿保存送檢,促腎上腺素要注明采血時間(上午8時或下午4時)
6、皮質(zhì)醇用血清做,由于血中皮質(zhì)醇的濃度在一日內(nèi)有晝夜節(jié)律性變化,參考值也分上午8:00和下午4:00、夜間10:00,所以一定要在送檢中心的申清單上寫上抽血時間。
7、24小時尿游離皮質(zhì)醇測定:收集24h尿液,用5-10ml濃鹽酸防腐,記下總量,混勻取5ml送檢。
8、男性:取尿道分泌物用細小棉拭子伸入尿道約2-4厘米,略捻拭子取出分泌物(應(yīng)略帶黏膜)。將分泌物或棉拭子置1.5毫升離心管中加上1毫升無菌生理鹽水,將拭子在試管中旋轉(zhuǎn),充分攪拌,處理好后,將蓋子壓緊,用膠布密封管口,以防標本外泄,并寫清楚姓名。(處理標本時要做到無菌操作);
女性:陰道----用無菌生理鹽水棉球洗去宮頸外分泌物(避免白帶),再用無菌棉拭子插入宮頸內(nèi),停5秒鐘后旋動棉拭子采取宮頸分泌物,將棉拭子置入1.5毫升離心管中加上1毫升無菌生理鹽水,將拭子在試管中旋轉(zhuǎn),充分攪拌,處理好后,將蓋子壓緊,用膠布密封管口,以防標本外泄,并寫清楚姓名。(處理標本時要做到無菌操作);
尖銳濕疣應(yīng)采集疣體或組織液于無菌試管內(nèi)送檢。
9、微生物培養(yǎng)標本的采集
基本原則
a、發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)及時采集微生物標本作病原學檢查,二、三級醫(yī)院微生物標本送檢率不應(yīng)低于70%;
b、盡量在抗菌藥物使用前采集標本;
c、標本采集時應(yīng)嚴格執(zhí)行無菌操作,減少或避免機體正常菌群及其他雜菌污染;
d、標本采集后應(yīng)立即送至實驗室,床邊接種可提高病原菌檢出率;
e、以棉拭子采集的標本如咽拭、肛拭或傷口拭子,宜采用插入運送培養(yǎng)基送檢;
f、混有正常菌群的標本如咳痰、尿液、傷口拭子,不可置肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢;
g、盛標本容器須經(jīng)滅菌處理,但不得使用消毒劑;h、送檢標本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康,使實驗室能正確選用相應(yīng)的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境。
注意:
細菌培養(yǎng)的標本收集時應(yīng)注意無菌操作,所用的培養(yǎng)杯、試管必須是無菌的。
a、下呼吸道分泌物(痰液):囑患者清晨起床后用于清水漱口,不要刷牙,立即從下呼吸道咳出第一口痰,吐在專用的無菌杯內(nèi),常溫保存送檢.對于不能及時送檢者,可暫存4℃冰箱.
b、糞便:取有黏液、濃血部分的糞便約2-3克(如稀水便則取絮化物),盛于滅菌廣口瓶或無菌容器中。用棉拭挑取糞便插入運送培養(yǎng)基或PH7.0的磷酸鹽甘油中送檢,可提高病原菌檢出率。
c、血液、腦脊液、膽汁、穿刺液、胸腹水、心包液、關(guān)節(jié)腔液、鞘膜積液:無菌抽取5ml注入專用培養(yǎng)瓶(增菌液)中,輕輕混勻,常溫保存送檢。
d、尿液培養(yǎng):取中段尿5-10ml于無菌試管中送檢。
e、生殖器官標本:陰道、子宮、頸及前列腺等分泌物應(yīng)由醫(yī)生采集,收集于無菌試管內(nèi)送檢。尖銳濕疣應(yīng)采集疣體或組織液于無菌試管內(nèi)送檢。
f、燒傷標本:以專用無菌棉拭子直接采取多個部位創(chuàng)面的濃液分泌物放入于無菌試管內(nèi)送檢。
10、結(jié)核桿菌DNA定量檢測:血清、母乳、臍血、眼部分泌物、陰道分泌物、精液、尿道分泌物等體液標本及各種組織標本。
11、瘧原蟲:發(fā)熱后10小時內(nèi)抽末稍血瑞氏染色鏡檢
12、液基薄層細胞學采集:將專用刷子平行插入子宮頸內(nèi),直到刷子最下面的刷毛暴露在子宮外為止。用力輕輕固定、避免刷子滑出;然后將宮頸刷向同一方向轉(zhuǎn)3-5圈,不要太用力或轉(zhuǎn)得過多以免出血沖淡細胞,要使用恰當?shù)牧Χ缺WC取到更多的細胞。
注意:
a、經(jīng)期不能取材;
b、分泌物太多時要用干棉簽擦干凈后再;
c、宮頸糜爛嚴重的旋轉(zhuǎn)不要超過3圈,以免出血;
d、旋轉(zhuǎn)時向同一方向,勿來回轉(zhuǎn)動以免加大創(chuàng)傷引起出血。
影響結(jié)果的生物學因素
1、年齡
從胎兒出生到兒童、成年和老年的各個時期檢查的正常參考值都不完全相同,不能用同一標準來衡量。新生兒出生的頭幾天紅細胞計數(shù)和血紅蛋白含量比成人高,兒童血液中堿性磷酸酶含量較成人高,老年人膽固醇含量較高所以易患動脈粥樣硬化癥。
2、性別
男性肌肉比較發(fā)達,所以血液中肌肝、肌酸激酶含量較女性高。其他男性較女性高的指標有甘油三脂,r-谷胺酰轉(zhuǎn)移酶,膽紅素,轉(zhuǎn)氨酶,尿素,紅細胞,血紅蛋白等。女性比男性高的指標有高密度脂蛋白膽固醇,載脂蛋白AⅠ,女性激素和網(wǎng)織紅細胞等。
3、妊娠
隨著孕期的延長,孕婦各系統(tǒng)將發(fā)生一系列的生理性變化,如甲狀腺素分泌增加,總蛋白,白蛋白含量減少,腎小球濾過率增加,尿量增多,紅細胞沉降率加快,凝血因子活性增強,纖維蛋白原增多,甲胎蛋白升高等。
4、飲食
飲食對血液生化檢驗指標的影響取決于飲食的成分和進食時間
餐后抽血檢查對血脂、血糖、轉(zhuǎn)氨酶、膽紅素、無機磷、尿酸、尿素、總蛋白、鉀、鈉、鈣等都有較大的影響,因此在測定這些指標時應(yīng)禁食12小時。飲酒可使糖異生受抑制,從而導致血糖降低,血乳酸、尿酸升高。長期酗酒可引起肝臟損害,r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶升高。
5、運動
由于呼吸加快,出汗較多,體液分布發(fā)生改變導致血液生化指標的明顯變化。如馬拉松運動員跑完全程后45分鐘抽血檢查與賽前相比,鉀、鈉、鈣、堿性磷酸酶、白蛋白、血糖、無機磷、轉(zhuǎn)氨酶、尿素、尿酸、膽紅素等將升高1倍以上。因此采集標本前應(yīng)注意休息,避免劇烈運動。
6、藥物和毒品
藥物和毒品對生化檢驗可帶來復雜的影響,它們不僅可改變某些物質(zhì)在體內(nèi)的代謝過程,同時也可干擾實驗過程中的化學反應(yīng),如維生素C,它是一種還原劑,可干擾葡萄糖氧化酶法測定血糖,使之降低而誤認為低血糖。長期口服避孕藥和雌激素類藥物可使轉(zhuǎn)鐵蛋白、甘油三脂升高,因此在采血前應(yīng)停用這藥物。嗎啡可使血淀粉酶、脂肪酶、轉(zhuǎn)氨酶、肝、尿酸、血糖降低。
一份標本是否合格直接決定著檢驗質(zhì)量,更關(guān)乎著病人的生命和健康,采集合格標本,認真的去分析標本的影響因素,從而為病人的健康保駕護航,真正的做到檢以求真,驗以求實,是我們每個檢驗人義不容辭的責任!
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