

魯炳懷教授:中日友好醫(yī)院,呼吸與危重癥科二部臨床微生物與感染實(shí)驗(yàn)室主任醫(yī)師(資格),副教授,北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部碩士生導(dǎo)師。還擔(dān)任中華醫(yī)學(xué)會(huì)熱帶病與寄生蟲分會(huì)青年學(xué)組委員,中國(guó)微生物學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)與免疫學(xué)專委會(huì)真菌學(xué)組常委委員,華人藥敏試驗(yàn)委員會(huì)(ChiCAST)委員,北京醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)理事。主持科研課題5項(xiàng),包括2項(xiàng)北京市級(jí)科研項(xiàng)目。在國(guó)內(nèi)外發(fā)表文章53篇(其中作為第一作者/通迅作者發(fā)表SCI收錄文章13篇),參加臨床微生物書籍編寫3部。
中日友好醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科二部臨床微生物與感染實(shí)驗(yàn)室的魯炳懷教授帶來(lái)了題為《分子生物學(xué)在臨床病原微生物鑒定中的應(yīng)用》的精彩演講。

在臨床,如果懷疑感染的話,會(huì)根據(jù)病原來(lái)決定檢測(cè)病原體的方法,常見的病原體檢測(cè)方法有微生物學(xué)方法、免疫學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。其中,微生物學(xué)法主要包括病原體的分離培養(yǎng)和鏡檢,免疫學(xué)方法和生物學(xué)方法等。病原體的分離培養(yǎng)和鏡檢等方法的檢測(cè)靶向?yàn)椴≡w,優(yōu)勢(shì)是金標(biāo)準(zhǔn),而劣勢(shì)則是檢測(cè)耗時(shí)相對(duì)較長(zhǎng)。免疫學(xué)方法包括免疫熒光法、酶聯(lián)免疫法和膠體金法等,檢測(cè)靶向?yàn)榭乖涂贵w,優(yōu)勢(shì)是簡(jiǎn)便快速,而抗原靈敏度較低、抗體檢測(cè)窗口期長(zhǎng)是其劣勢(shì)。而今天我們講的分子生物學(xué)方法主要包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR法等,檢測(cè)靶向變成了核酸DNA/RNA,靈敏度高、特異性強(qiáng)等特性都是其相較其他檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)所在。
最近幾年,分子生物學(xué)檢測(cè)方法的發(fā)展突飛猛進(jìn),目前分子生物學(xué)在臨床病原微生物鑒定中的應(yīng)用主要有細(xì)菌,分支桿菌,病毒,真菌,支原體、衣原體,非擴(kuò)增核酸技術(shù),擴(kuò)增核酸技術(shù)以及測(cè)序等。其中,測(cè)序技術(shù)也許在將來(lái)會(huì)取代很多PCR的應(yīng)用,這也是中國(guó)在分子生物學(xué)技術(shù)上實(shí)現(xiàn)彎道超車的非常好的機(jī)會(huì)。除此之外,魯教授還就基因芯片、實(shí)時(shí)熒光定量PCR和新一代高通量測(cè)序技術(shù)等進(jìn)行了闡述,這些新技術(shù)用于微生物檢測(cè),使微生物基因組學(xué)獲得了長(zhǎng)足的發(fā)展。

如果大家在工作中碰到一個(gè)菌,魯教授建議大家嘗試用全基因組的方法去分析一下它的毒力、耐藥基因和鑒定。拿一個(gè)微小桿菌肺部感染而死亡的患者舉例,微小桿菌作為陽(yáng)性桿菌毒力應(yīng)該沒(méi)那么強(qiáng),所以魯教授當(dāng)時(shí)就做了毒力和耐藥基因的相關(guān)分析,他將有趣的分析結(jié)果拿出來(lái)和我們作了分享,并表示這是以后的研究方向。
接著,魯教授談到了血流感染。對(duì)于血流感染,目前大家詬病的主要問(wèn)題有兩個(gè),一是有很多感染沒(méi)檢測(cè)出來(lái),二是我們報(bào)告的時(shí)間比較晚,患者如果是膿毒血癥的話,傳統(tǒng)的檢測(cè)方法不能給臨床一個(gè)及時(shí)的報(bào)告。今天,隨著分子生物學(xué)逐漸的廣泛應(yīng)用,這些問(wèn)題得到了較大改善。魯教授分享了一些廠家的血流感染分子測(cè)試,諸如羅氏、雅培等,他對(duì)羅氏的儀器印象很深,覺得他們的panel設(shè)計(jì)得很好,一次可以做十幾個(gè)或二十幾個(gè)病原,但是因?yàn)閮r(jià)格太貴,沒(méi)有進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng),大家可以借鑒。另外還介紹了一些在臨床實(shí)驗(yàn)室中非常實(shí)用的產(chǎn)品,特異性、靈敏性都是很重要的參考因素,希望中國(guó)的本土企業(yè)能在這些方向做出自己的成績(jī)。
魯教授還就兒童呼吸道感染致病微生物、肺炎支原體血清學(xué)+PCR、呼吸道病毒和真菌感染的檢測(cè)方法等問(wèn)題進(jìn)行了闡述。這些病毒在臨床工作中并不是很常見,魯教授建議如果大家有條件可以做培養(yǎng),我們有熒光顯微鏡的方法去做相應(yīng)的鑒定,如果沒(méi)有條件的話,PCR的方法也是很好的診斷手段,做感染性疾病的話病原是非常關(guān)鍵的,如果微生物實(shí)驗(yàn)室的力量跟不上的話,會(huì)對(duì)整個(gè)臨床診斷造成麻煩。

他還談到了臨床實(shí)驗(yàn)室的建立和擴(kuò)張。和先進(jìn)國(guó)家比如美國(guó)的實(shí)驗(yàn)室相比,國(guó)內(nèi)的臨床實(shí)驗(yàn)室差距在哪?通過(guò)和美國(guó)臨床工作者的交流發(fā)現(xiàn),我們的臨床實(shí)驗(yàn)室和美國(guó)的差不太多,美國(guó)有的東西我們基本上都有,比較缺的領(lǐng)域是質(zhì)譜和測(cè)序,美國(guó)的臨床實(shí)驗(yàn)室可以自己完成簡(jiǎn)單的測(cè)序,而國(guó)內(nèi)的實(shí)驗(yàn)室自己做測(cè)序的還比較少,大部分都會(huì)送到第三方或者科研機(jī)構(gòu)去做。魯教授希望以后有比較好的產(chǎn)品可以走入我們的實(shí)驗(yàn)室,一旦病原體診斷明確以后,會(huì)給患者帶來(lái)很大的好處,尤其是很嚴(yán)重的感染疾病肆虐期間。希望我們國(guó)內(nèi)也能有高端的產(chǎn)品出來(lái),不要總是在低端產(chǎn)品上爭(zhēng)的死去活來(lái)。
魯教授最后總結(jié)道,傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法可能永遠(yuǎn)不會(huì)被替代,只是起的作用和應(yīng)用的領(lǐng)域會(huì)慢慢變小。的確,分子生物學(xué)的引進(jìn),質(zhì)譜的引進(jìn),對(duì)微生物的發(fā)展前景,對(duì)微生物在整個(gè)臨床中的位置都起到了關(guān)鍵的作用。他希望,在座的各位年輕同事能一起努力,把我們國(guó)內(nèi)臨床微生物的事業(yè)做得越來(lái)越好。
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