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有文獻(xiàn)報(bào)道，晚期肺癌患者中有10%—15%的比例由于受到各種客觀原因限制，無法進(jìn)行穿刺活檢，從而導(dǎo)致在對(duì)一代靶向藥物產(chǎn)生耐藥性后無法通過組織活檢尋找后續(xù)治療方案，這讓患者身陷絕望的境地。不過現(xiàn)在只要采集10毫升的血液，就可以通過“液態(tài)活檢”這一新型檢測手段為這些患者找到出路，而這項(xiàng)技術(shù)也可用于其他癌癥的監(jiān)測治療。

在日前舉行的美國癌癥研究協(xié)會(huì)2018年會(huì)上，上海市胸科醫(yī)院檢驗(yàn)科主任婁加陶主持的“外周血循環(huán)腫瘤DNA二代測序檢測平臺(tái)實(shí)驗(yàn)室自建項(xiàng)目”在大會(huì)上驚艷亮相，成為“液態(tài)活檢”分論壇唯一的以中國臨床實(shí)驗(yàn)室專家為主導(dǎo)的科研項(xiàng)目報(bào)告。

液態(tài)活檢究竟是怎樣的“黑科技”？一起走進(jìn)胸科醫(yī)院的檢驗(yàn)科，聽婁加陶主任解析這項(xiàng)神奇的技術(shù)。

捕捉血液中DNA突變

今后的癌癥檢驗(yàn)或許不再須要手術(shù)活檢或穿刺活檢了，這項(xiàng)新型體外檢測方法將為癌癥的診斷和治療找到新途徑。液態(tài)活檢技術(shù)被《麻省理工科技評(píng)論》評(píng)為2015年十大突破之一，該技術(shù)主要是以患者的體液作為腫瘤活檢的樣本，捕捉和檢測的對(duì)象包括體液中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞、循環(huán)腫瘤DNA和外泌體。

人體內(nèi)有數(shù)以億計(jì)的細(xì)胞，細(xì)胞死后會(huì)將DNA釋放到血液中，液態(tài)活檢就是通過檢測手段從這些游離在血液間的細(xì)胞DNA中發(fā)現(xiàn)癌癥的突變，從而甄別癌癥的性質(zhì)，并找到有針對(duì)性的治療方向。

為晚期肺癌患者打開“一扇窗”

在晚期肺癌治療時(shí)需要小樣本活檢明確病理分型和分子分型，以選擇適宜的靶向藥物，當(dāng)患者對(duì)第一代靶向藥物產(chǎn)生耐藥后，還需要二次活檢，以了解基因突變類型，使后續(xù)治療更有針對(duì)性。腫瘤是具有異質(zhì)性的疾病，特別是對(duì)于癌細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者而言，組織活檢也并非能為后續(xù)治療尋找最佳方案。更何況，在晚期肺癌患者中有相當(dāng)一部分患者，在發(fā)生耐藥后，身體已無法承受半年甚至更短時(shí)間內(nèi)再次進(jìn)行創(chuàng)傷性穿刺活檢。

3年多前，我院曾接診一位罹患肺癌晚期的東北老人，身體狀況已經(jīng)無法耐受化療和反復(fù)地組織活檢，當(dāng)?shù)蒯t(yī)院均束手無策�；颊呒覍佥氜D(zhuǎn)打聽到我院的檢驗(yàn)科有液態(tài)活檢的檢測，抱著最后的希望來我院就診。接診后，我們通過最新的檢測方式，在患者的胸水和血液標(biāo)本中均檢出了EGFR基因L858R突變，為患者進(jìn)行針對(duì)性的肺癌靶向治療提供依據(jù)。2個(gè)月后，患者病情開始好轉(zhuǎn)，體內(nèi)腫瘤開始縮小。其后，患者根據(jù)我們團(tuán)隊(duì)的檢測指導(dǎo)，及時(shí)調(diào)整用藥，目前病情穩(wěn)定。

我院檢驗(yàn)科建立的外周血循環(huán)腫瘤DNA二代測序檢測平臺(tái)在臨床檢驗(yàn)中呈現(xiàn)極高的靈敏度和特異度，在晚期初診肺癌患者的外周血循環(huán)腫瘤DNA樣本中，與腫瘤組織ARMS技術(shù)的一致率為94%，可達(dá)到與傳統(tǒng)的金標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)一樣的檢測水平。該平臺(tái)可同時(shí)檢測肺癌EGFR/KRAS/BRAF基因多位點(diǎn)及罕見位點(diǎn)突變，可用于非小細(xì)胞肺癌患者的靶向治療藥物選擇指導(dǎo)、耐藥檢測及全程監(jiān)測。醫(yī)院將推廣二代測序平臺(tái)運(yùn)用于臨床服務(wù)，用于患者的精準(zhǔn)診斷及個(gè)體化用藥指導(dǎo)等方面。

緊扣液態(tài)活檢檢測臨床應(yīng)用痛點(diǎn)

液態(tài)活檢技術(shù)是近年來體外診斷關(guān)注的焦點(diǎn)，有大量研究表明液態(tài)活檢在腫瘤領(lǐng)域存在巨大潛力。但是，由于測試的內(nèi)容是人體血液中的游離腫瘤DNA，而從病灶釋放到血液中的DNA在不同的階段和時(shí)間會(huì)有很大差異，循環(huán)腫瘤DNA的半衰期只有2個(gè)小時(shí)等客觀條件，這都要求液態(tài)活檢每一個(gè)環(huán)節(jié)從嚴(yán)把關(guān)，以確保檢測結(jié)果的精準(zhǔn)性。擺在醫(yī)務(wù)人員面前的諸多障礙，包括技術(shù)的限制、檢測標(biāo)準(zhǔn)的缺乏、監(jiān)管審批的缺乏及應(yīng)用市場的混亂。

前不久，美國臨床腫瘤學(xué)會(huì)和美國病理家學(xué)院發(fā)表聯(lián)合評(píng)論中稱，循環(huán)腫瘤DNA的臨床應(yīng)用之所以還未能成熟，最主要的原因之一就是很多基于該技術(shù)的臨床應(yīng)用并沒有建立在對(duì)檢測方法充分的“實(shí)驗(yàn)室性能確認(rèn)”及“臨床性能確認(rèn)”基礎(chǔ)之上。這對(duì)于傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)檢測項(xiàng)目而言，是無法想象的。

具體而言，這種現(xiàn)狀產(chǎn)生的根源還是市場驅(qū)動(dòng)的許多循環(huán)腫瘤DNA檢測走得太快，片面求新而忽視了測試的性能驗(yàn)證。我院檢驗(yàn)科團(tuán)隊(duì)致力于將循環(huán)腫瘤DNA的檢測回歸到醫(yī)學(xué)檢測這一起點(diǎn)，立足于“準(zhǔn)確性”與“臨床有效性”這兩個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，對(duì)相關(guān)試劑盒進(jìn)行謹(jǐn)慎的性能驗(yàn)證，采用多種方法進(jìn)行“頭對(duì)頭”的嚴(yán)格比較。只有這樣，才能有效地考量一個(gè)技術(shù)平臺(tái)是否準(zhǔn)確可靠，才能更深一步討論基于這個(gè)平臺(tái)的醫(yī)學(xué)檢測的臨床應(yīng)用價(jià)值和意義。

在該項(xiàng)研究中，我們突出了基于標(biāo)準(zhǔn)品的實(shí)驗(yàn)室性能驗(yàn)證和基于臨床樣品的臨床性能驗(yàn)證，我們選擇了多種方法進(jìn)行‘頭對(duì)頭’的比對(duì)和校驗(yàn)，我們?cè)谶x擇驗(yàn)證的臨床樣品時(shí)充分考慮到未來真實(shí)檢測世界中各種臨床應(yīng)用情境。我相信在實(shí)現(xiàn)規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化后，這項(xiàng)技術(shù)會(huì)在很多方向上助力精準(zhǔn)醫(yī)療。我們重視以新的分子診斷技術(shù)前瞻性地建設(shè)科室檢測能力。長遠(yuǎn)地看，我覺得在合規(guī)的前提下，擁有專業(yè)人員及設(shè)備的院內(nèi)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，有充分的動(dòng)力自主開展相關(guān)檢測，來保證對(duì)檢測流程更高質(zhì)量的把控、對(duì)檢測數(shù)據(jù)的有效積累，同時(shí)降低檢測成本，縮短檢測周期，以求得最終更好地服務(wù)于臨床醫(yī)生，服務(wù)于患者。