亚洲精品久久无码2021,偷拍亚洲另类无码专区制服,亚洲欧美性都花花世界,国产熟女的精品视频大全,色偷偷2025免费视频观看,撅着大腚SXMV色香视频

概念：化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析，別稱：化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA ) ,是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析儀器。

化學(xué)發(fā)光免疫分析儀包含兩個部分， 即免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)。

原理：利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化和氧化劑的氧化， 形成一個激發(fā)態(tài)的中間體， 當(dāng)這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時， 同時發(fā)射出光子(hM) , 利用發(fā)光信號測量儀器測量光量子產(chǎn)額。免疫反應(yīng)系統(tǒng)是將發(fā)光物質(zhì)（在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體） 直接標(biāo)記在抗原（化學(xué)發(fā)光免疫分析） 或抗體（免疫化學(xué)發(fā)光分析） 上， 或酶作用于發(fā)光底物。

化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器中核心探測器件為光電倍增管（PMT），由單光子檢測并傳輸至放大器，并加高壓電流放大，放大器將模擬電流轉(zhuǎn)化為數(shù)字電流，數(shù)字電流將發(fā)光信號由R232數(shù)據(jù)線傳輸給電腦并加以計算，得出臨床結(jié)果。

化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析法

化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析又稱化學(xué)發(fā)光免疫分析(CL IA ) ,是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的發(fā)光標(biāo)記物 , 其通過起動發(fā)光試劑作用而發(fā)光, 強(qiáng)烈的直接發(fā)光在一秒鐘內(nèi)完成,為快速的閃爍發(fā)光。吖啶酯作為標(biāo)記物用于免疫分析, 其化學(xué)反應(yīng)簡單、快速、無須催化劑; 檢測小分子抗原采用競爭法 ,大分子抗原則采用夾心法 , 非特異性結(jié)合少, 本底低; 與大分子的結(jié)合不會減小所產(chǎn)生的光量, 從而增加靈敏度。

發(fā)光酶免疫分析法

從標(biāo)記免疫分析角度, 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL EIA ) , 應(yīng)屬酶免疫分析, 只是酶反應(yīng)的底物是發(fā)光劑,操作步驟與酶免分析完全相同: 以酶標(biāo)記生物活性物質(zhì)(如酶標(biāo)記的抗原或抗體) 進(jìn)行免疫反應(yīng), 免疫反應(yīng)復(fù)合物上的酶再作用于發(fā)光底物,在信號試劑作用下發(fā)光, 用發(fā)光信號測定儀進(jìn)行發(fā)光測定。目前常用的標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(ALP) ,它們有各自的發(fā)光底物。

發(fā)光試劑

HRP 標(biāo)記的CLEIA常用的底物為魯米諾(32氨基鄰苯二甲酰肼,luminol) ,或其衍生物如異魯米諾(42氨基鄰苯二甲酰肼) ,是一類重要的發(fā)光試劑。魯米諾的氧化反應(yīng)在堿性緩沖液中進(jìn)行,在過氧化物酶及活性氧存在下,生成激發(fā)態(tài)中間體, 當(dāng)其回到基態(tài)時發(fā)光, 其波長為425nm。

早期用魯米諾直接標(biāo)記抗原(或抗體) ,但標(biāo)記后發(fā)光強(qiáng)度降低而使靈敏度受到影響。近來用過氧化物酶標(biāo)記抗體, 進(jìn)行免疫反應(yīng)后利用魯米諾作為發(fā)光底物, 在過氧化物酶和起動發(fā)光試劑作用下, 魯米諾發(fā)光, 發(fā)光強(qiáng)度依賴于酶免疫反應(yīng)物中酶的濃度。

增強(qiáng)發(fā)光酶

增強(qiáng)發(fā)光酶免疫分析(enhanced luminescence enzyme immunoassay, ELEIA )在發(fā)光系統(tǒng)中加入增強(qiáng)發(fā)光劑, 如對2碘苯酚等, 以增強(qiáng)發(fā)光信號,并在較長時間內(nèi)保持穩(wěn)定, 便于重復(fù)測量, 從而提高分析靈敏度和準(zhǔn)確性。在全自動分析儀上, 還可通過計算機(jī)嚴(yán)密控制, 進(jìn)行自動操作, 如加試劑,混合, 溫育, 洗滌, 加發(fā)光試劑, 發(fā)光計數(shù), 數(shù)據(jù)處理, 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線, 直至完成病人血清樣品的分析并打印出結(jié)果。

ALP標(biāo)記的CLEIA所用底物為環(huán)1, 22二氧乙烷衍生物, 這是一類很有前途的發(fā)光底物 ,用于化學(xué)發(fā)光酶免分析底物而設(shè)計的分子結(jié)構(gòu)中包含起穩(wěn)定作用的基團(tuán)——金剛烷基, 其分子中發(fā)光基團(tuán)為芳香基團(tuán)和酶作用的基團(tuán),在酶及起動發(fā)光試劑作用下引起化學(xué)發(fā)光。最常使用的底物是AMP PD在堿性磷酸酶(ALP) 作用下,磷酸酯基發(fā)生水解而脫去一個磷酸基, 得到一個中等穩(wěn)定的中間體AMPD (半壽期為2～ 30min) ,此中間體經(jīng)分子內(nèi)電子轉(zhuǎn)移裂解為一分子的金剛烷酮和一分子處于激發(fā)態(tài)的間氧苯甲酸甲酯陰離子, 當(dāng)其回到基態(tài)時產(chǎn)生470nm 的光,可持續(xù)幾十分鐘。AMPPD為磷酸酯酶的直接化學(xué)發(fā)光底物,可用來檢測堿性磷酸酯酶或酶和抗體核酸探針及其它配基的結(jié)合�？蓹z測到堿性磷酸酯酶的濃度為10- 15mol/L。