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1.腫瘤標(biāo)志物概述
腫瘤標(biāo)志物（tumor markers）是1978年召開的人類免疫及腫瘤免疫診斷會上提出的，次年在第七屆腫瘤發(fā)生生物學(xué)和醫(yī)學(xué)會議上作為一專用術(shù)語被大家公認(rèn)。腫瘤標(biāo)志物是惡性腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生或宿主的其它細(xì)胞對惡性腫瘤反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)。大部分腫瘤標(biāo)記物在正常人群中也可以測得一定的濃度，但腫瘤病人其濃度會顯著升高。腫瘤標(biāo)志物可在血液、尿液、糞便、胸腹水及腫瘤組織中被發(fā)現(xiàn)。業(yè)內(nèi)提及的"腫瘤標(biāo)志物"通常是指俠義上的"血清腫瘤標(biāo)志物"。也是應(yīng)用最廣市場容量最大的部分。本節(jié)的重點(diǎn)也是圍繞血清腫瘤標(biāo)志物來論述。廣義上來說，與腫瘤篩查、診斷、用藥及預(yù)后相關(guān)的各種基因突變、表達(dá)、甲基化等指標(biāo)也都是腫瘤標(biāo)志物。

目前在臨床上常用的血清腫瘤標(biāo)志物有接近二十個(gè)指標(biāo)。這些標(biāo)志物中少部分指標(biāo)只與一種類型的腫瘤有關(guān)，而另大部分指標(biāo)可能會與多種腫瘤相關(guān)。目前尚未發(fā)現(xiàn)"通用"腫瘤標(biāo)志物，也就是說不能用一種標(biāo)志物檢測所有腫瘤。迄今也尚未發(fā)現(xiàn)靈敏度特異度都理想的腫瘤標(biāo)志物。也就是某些非腫瘤的人群腫瘤標(biāo)志物有時(shí)會升高，同時(shí)某些腫瘤病人現(xiàn)有腫瘤標(biāo)志物可能都不高。所有在解釋腫瘤標(biāo)志物的檢測結(jié)果時(shí)，應(yīng)注意腫瘤標(biāo)志物的這些局限性。

1.2腫瘤標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和臨床應(yīng)用的發(fā)展歷史
1.2.1腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展史
腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展歷史大體可分為五個(gè)階段：
自從1846年Henrey Bence-Jones在多發(fā)性骨髓瘤患者的尿液和體液中發(fā)現(xiàn)了最早的腫瘤標(biāo)志物—本-周蛋白(Bence-Jones protein)后，有關(guān)腫瘤標(biāo)志物的研究到目前已有160多年的歷史。這是腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展的開始階段也是第一階段。

1927年Zondek B發(fā)現(xiàn)絨毛膜上皮激素（hCG）與婦女妊娠有關(guān)，也與婦科腫瘤有關(guān)[3]。1928年Brown等報(bào)道了促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)與肺癌異位內(nèi)分泌綜合征相關(guān)。1959年，Markert研究發(fā)現(xiàn)了某些酶和(或)同工酶酶譜變化與一些惡性腫瘤之間的關(guān)系。這是腫瘤標(biāo)志物發(fā)展的第二階段[1]。

1963年Abelev證實(shí)并發(fā)現(xiàn)了原發(fā)性肝癌標(biāo)志物甲胎蛋白（AFP）。1965年Gold和Freedman發(fā)現(xiàn)的直腸癌標(biāo)志物癌胚抗原（CEA）。1975年Rose SW等發(fā)現(xiàn)胚胎蛋白可作為腫瘤標(biāo)志物，并根據(jù)20世紀(jì)60年代初Yalow RS等建立的免疫學(xué)測定法檢測血中的腫瘤標(biāo)志物，從而開始在臨床上檢測血清中的腫瘤標(biāo)志物[6]。1975年Kohler和Milstein創(chuàng)造性地運(yùn)用雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體，并因此獲得了諾貝爾獎(jiǎng)[7]。隨著技術(shù)的發(fā)展更多的腫瘤標(biāo)志物如CA系列抗原被發(fā)現(xiàn)。1978年，Herberman在美國NCI召開的人類免疫及腫瘤免疫診斷學(xué)術(shù)大會上提出了腫瘤標(biāo)志物的概念，1979年在英國第七屆腫瘤發(fā)生生物學(xué)和醫(yī)學(xué)會議上被確認(rèn)。這是腫瘤標(biāo)志物發(fā)展的第三階段。

1989年因Weinbery和Bishop發(fā)現(xiàn)癌基因研究中的卓越貢獻(xiàn)獲得了當(dāng)年的諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，他們將腫瘤標(biāo)志的研究擴(kuò)展提高到基因水平。之后由于人類基因組計(jì)劃（HGP）使人類基因組序列草圖順完成以及各種分子檢測技術(shù)的發(fā)展，使腫瘤標(biāo)志進(jìn)入了腫瘤基因標(biāo)志階段，即發(fā)展的第四階段。
腫瘤標(biāo)志發(fā)展的第五階段即由腫瘤基因標(biāo)志階段進(jìn)入蛋白質(zhì)組學(xué)階段，目前蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域，使腫瘤標(biāo)志概念延伸到生物學(xué)標(biāo)志，并促使其發(fā)展成了一個(gè)系統(tǒng)的學(xué)科，即腫瘤標(biāo)志學(xué)。

1.2.2腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用
1.2.2.1腫瘤的篩查
由于目前腫瘤標(biāo)志物陽性率和特異性均不理想，很少被用于健康人群普查。目前已經(jīng)用于或理論上能用于無癥狀人群進(jìn)行篩查的有前列腺特異抗原（PSA）和甲胎蛋白（AFP），日本等國家把胃蛋白酶原作為胃癌篩查的指標(biāo)。由于受到靈敏度特異性等的局限以及投入產(chǎn)出比的困擾，腫瘤標(biāo)志物用于篩查尚面臨諸多挑戰(zhàn)。大多腫瘤標(biāo)志物均只能針對高危人群進(jìn)行檢查。

1.2.2.2腫瘤的鑒別診斷與分期
腫瘤標(biāo)志物可用于鑒別良、惡性腫瘤，此時(shí)臨床已獲得足夠證據(jù)證明患者可能患某臟器腫瘤，腫瘤標(biāo)志物往往能提供有用的信息幫助區(qū)分良、惡性腫瘤。
由于部分血清腫瘤標(biāo)志物的升高水平常和腫瘤的大小和惡性程度有關(guān)，腫瘤標(biāo)志物的定量檢測可以有助于臨床分期，能判斷疾病處于穩(wěn)定期、進(jìn)展期或惡化期。 但需注意各期腫瘤的腫瘤標(biāo)志物濃度變化范圍較寬，會有相互重疊。

1.2.2.3腫瘤的預(yù)后判斷
一般來說治療前腫瘤標(biāo)志物濃度明顯異常，表明腫瘤較大，患病較長，可能已有轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差。

1.2.2.4腫瘤的療效監(jiān)測
大部分腫瘤標(biāo)志物的測值和腫瘤治療效果相關(guān)，因此有助于評價(jià)手術(shù)、放療、化療和生物治療手段是否有效。標(biāo)志物下降程度反映了治療成功程度。 

1.2.2.5腫瘤復(fù)發(fā)監(jiān)測
惡性腫瘤治療結(jié)束應(yīng)定期監(jiān)測治療前升高的腫瘤標(biāo)志物，以監(jiān)測復(fù)發(fā)情況。一般建議治療后第6周做第1次檢測，隨后每3個(gè)月檢測一次，至第4年時(shí)可降低頻率檢測。如果出現(xiàn)明顯升高25%，應(yīng)在1個(gè)月內(nèi)復(fù)測，連續(xù)兩次升高，可預(yù)示復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。

1.3腫瘤標(biāo)志物主要檢測方法發(fā)展
如前所敘，腫瘤標(biāo)志物包括血清蛋白激素類和基因類指標(biāo)。所以，檢測方法也分別相對應(yīng)地有標(biāo)記免疫檢測和分子檢測。目前血清蛋白腫瘤標(biāo)志物標(biāo)記免疫檢測常有如下方法：放射性免疫分析、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、化學(xué)發(fā)光法、流式熒光發(fā)光法等。各個(gè)方法學(xué)發(fā)展歷程見下表：

表：免疫檢測方法發(fā)展概況

1.4被國家藥監(jiān)局批準(zhǔn)的主要血清腫瘤標(biāo)志物
目前腫瘤標(biāo)志物在體外診斷試劑的分類目錄上是被劃分成三類醫(yī)療器械。全部的腫瘤標(biāo)志物相關(guān)試劑都?xì)w屬于國家食品藥品監(jiān)督管理總局受理審評。截止2015年年底，已經(jīng)被批準(zhǔn)的血清腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒總結(jié)如下（由于有分子診斷專門的章節(jié)，核酸分子類的腫瘤標(biāo)志物不在此贅述）：

表：已注冊的血清常見腫瘤標(biāo)志物及其主要應(yīng)用范圍

1.5國內(nèi)腫瘤標(biāo)志物相關(guān)檢測產(chǎn)品主要生產(chǎn)企業(yè)
1.5.1目前臨床使用腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒獲證情況
所有已經(jīng)注冊的試劑都可以在國家食品藥品監(jiān)督管理總局的網(wǎng)站的數(shù)據(jù)庫內(nèi)檢索到。本文統(tǒng)計(jì)了截至2015年12月15日前獲批醫(yī)療器械注冊證的腫瘤標(biāo)志物類試劑盒相關(guān)情況。根據(jù)檢索到的數(shù)據(jù)，2015年國內(nèi)總計(jì)有78家體外診斷試劑公司涉及腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒的生產(chǎn)，累計(jì)有400個(gè)左右的醫(yī)療器械注冊證書。

表：國內(nèi)擁有腫瘤標(biāo)志物有效注冊證數(shù)前10位企業(yè)（不含校準(zhǔn)品、質(zhì)控品）

圖 已獲證腫瘤標(biāo)志物檢測試劑國產(chǎn)產(chǎn)品各類型占比分析

圖 國產(chǎn)腫瘤標(biāo)志物檢測試劑產(chǎn)品使用檢驗(yàn)方法學(xué)占比情況

1.5.2國內(nèi)主要公司簡介
1.5.2.1 上海透景科技股份有限公司
上海透景生命科技股份有限公司（Tellgen Corporation， 簡稱透景科技）成立于2003年11月，座落在有"藥谷"之稱的浦東張江高科技園區(qū)。

透景科技最具特色的技術(shù)是流式熒光發(fā)光技術(shù)。該技術(shù)平臺最重要的特點(diǎn)為多重高通量檢測，即一次檢測可以獲得多達(dá)幾十種上百種生物標(biāo)志物的檢測結(jié)果；同時(shí)，該技術(shù)平臺的檢測速度可高達(dá)每小時(shí)120-4000測試，是目前最高通量最快速度的檢測方法。該技術(shù)的應(yīng)用能大大提高檢測的速度和效率。

透景科技目前累計(jì)獲得50余項(xiàng)產(chǎn)品的注冊證。方法學(xué)包括流式熒光平臺、化學(xué)發(fā)光平臺和熒光PCR平臺。涉及腫瘤標(biāo)志物、質(zhì)控品、男性不育、宮頸癌篩查等。

透景科技共有腫瘤標(biāo)志物定量檢測試劑盒注冊證25個(gè)，可檢測腫瘤標(biāo)志物種類多達(dá)18種，是國內(nèi)腫瘤標(biāo)志物項(xiàng)目較全的公司之一。透景科技目前主要采用兩種方法學(xué)，一種為流式熒光發(fā)光法，該方法特點(diǎn)是可以實(shí)現(xiàn)多腫瘤標(biāo)志物的并行定量檢測，是為數(shù)不多的可實(shí)現(xiàn)多腫瘤標(biāo)志物高通量檢測的試劑盒。另外一種方法為化學(xué)發(fā)光法。

1.5.2.2 鄭州安圖生物工程股份有限公司
安圖生物成立于1999年，專業(yè)從事體外診斷試劑及儀器的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售，形成了以免疫診斷產(chǎn)品為主、微生物檢測產(chǎn)品特色發(fā)展的格局，產(chǎn)品品種齊全，能夠?yàn)榕R床診斷提供一系列解決方案。

目前公司已獲得 228 項(xiàng)產(chǎn)品注冊證書，產(chǎn)品覆蓋了免疫診斷、微生物檢測等領(lǐng)域的諸多方向，能夠滿足終端用戶的多種檢測需求。試劑品種涉及傳染病、腫瘤、生殖內(nèi)分泌、甲狀腺功能、肝纖維化、優(yōu)生優(yōu)育、糖尿病、高血壓、心臟病、泌尿生殖道疾病、呼吸系統(tǒng)疾病以及細(xì)菌分離培養(yǎng)、鑒定和藥敏分析等多個(gè)檢測方向。

其中腫瘤標(biāo)志物注冊證累計(jì)為25個(gè)，是國內(nèi)腫瘤標(biāo)志物產(chǎn)品較全的公司之一。包括板式化學(xué)發(fā)光、磁微粒化學(xué)發(fā)光、ELISA三種不同的方法學(xué)。

1.5.2.3北京科美生物技術(shù)有限公司
北京科美生物技術(shù)有限公司成立于1999年，目前現(xiàn)有員工200余名，資產(chǎn)過億，擁有符合國家醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范要求的凈化車間，并通過ISO13485認(rèn)證，年生產(chǎn)能力達(dá)到5000萬人份。

北京科美生物技術(shù)有限公司目前共獲得產(chǎn)品注冊證138個(gè)，產(chǎn)品集中在生化領(lǐng)域、、傳染病、腫瘤檢測、糖尿病、性激素檢測、甲狀腺功能檢測等領(lǐng)域。

腫瘤標(biāo)志物檢測使用方法學(xué)板式化學(xué)發(fā)光法。共獲得腫瘤標(biāo)志物定量檢測試劑盒注冊證15個(gè)，使用方法學(xué)為板式酶促化學(xué)發(fā)光法，公司同意大利合作開發(fā)有配套的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光檢測儀，儀器在瑞典生產(chǎn)。

1.5.2.9深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司
深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司成立于1995 年12 月，是專業(yè)從事研發(fā)、生產(chǎn)、銷售"化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器及體外診斷試劑"的國家級高新技術(shù)企業(yè)，注冊資本37040萬。公司自成立以來，一直專注于化學(xué)發(fā)光免疫分析領(lǐng)域的研究，并于2010年2月將第一臺全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑成功推上市場。
新產(chǎn)業(yè)生物公司目前主要擁有兩個(gè)技術(shù)平臺及配套試劑：（1）磁分離全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器及配套化學(xué)發(fā)光試劑（腫瘤標(biāo)志物、心肌標(biāo)志物、肝纖維化、激素、糖代謝、骨代謝等檢測試劑項(xiàng)目）；（2）全自動(dòng)生化分析儀器及配套生化試劑。公司共獲得產(chǎn)品注冊證92個(gè)，產(chǎn)品集中在生化領(lǐng)域、傳染病、腫瘤檢測、糖尿病、性激素檢測、甲狀腺功能檢測等領(lǐng)域。

腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒共獲得14個(gè)注冊證，腫瘤標(biāo)志物檢測使用方法學(xué)為磁微粒ABEI直接化學(xué)發(fā)光法。

1.6 腫瘤標(biāo)志物的市場
國內(nèi)目前的醫(yī)療體系下，腫瘤病人一般都在大醫(yī)院就診。故腫瘤標(biāo)志物產(chǎn)品主要用戶為高等級的醫(yī)院。比如三級醫(yī)院和大二級醫(yī)院。這些醫(yī)院采購的意愿總體還是偏向采購進(jìn)口試劑。

腫瘤標(biāo)志物檢測產(chǎn)品這個(gè)細(xì)分領(lǐng)域國內(nèi)確切的市場容量尚沒有來源可靠的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。根據(jù)相關(guān)報(bào)告，2015年化學(xué)發(fā)光總的市場容量大約在69億元。腫瘤標(biāo)志物市場大概占化學(xué)發(fā)光總?cè)萘康?0-60%左右。則市場容量在28-41億元。腫瘤標(biāo)志物檢測產(chǎn)品的市場約80%被進(jìn)口產(chǎn)品占領(lǐng)。進(jìn)口品牌主要是羅氏、雅培、西門子和貝克曼。國內(nèi)該領(lǐng)域的生產(chǎn)廠家最近幾年也發(fā)展較快，在腫瘤指標(biāo)的數(shù)目上已經(jīng)超過了進(jìn)口廠家。隨著國內(nèi)全自動(dòng)儀器的陸續(xù)上市和質(zhì)量的逐漸提高，國內(nèi)的廠家逐漸提高市場份額將成為趨勢。

目前腫瘤標(biāo)志物試劑各廠家結(jié)果的一致性還不夠。這可能與各廠家采用的檢測方法學(xué)不一樣，或者各廠家采用的檢測抗體表位不一致以及缺乏國際國家統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)品等因素有關(guān)。今后國家如能在標(biāo)準(zhǔn)品這個(gè)點(diǎn)入手，推出統(tǒng)一可溯源的國家級標(biāo)準(zhǔn)品，將有利于解決結(jié)果一致性和結(jié)果互認(rèn)的難題。

1.7 腫瘤標(biāo)志物研究領(lǐng)域未來展望
1.7.1新腫瘤標(biāo)志物的篩選
雖然針對腫瘤的生物標(biāo)志物已經(jīng)得到廣泛研究，然而，現(xiàn)已確認(rèn)或臨床證實(shí)可用于惡性腫瘤早期檢測、惡化或風(fēng)險(xiǎn)評估的生物標(biāo)志物卻不多。目前應(yīng)用較多的腫瘤標(biāo)志物，其靈敏度和特異性仍不甚理想。腫瘤標(biāo)志物研究已經(jīng)遇到了臨床應(yīng)用的瓶頸，我們還需要進(jìn)行大量的基礎(chǔ)研究找到更為理想的腫瘤標(biāo)志物。因此未來腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展方向是開發(fā)高特異性和高靈敏度的標(biāo)志物，對腫瘤能達(dá)到極高的早期診率，能夠準(zhǔn)確地預(yù)示腫瘤轉(zhuǎn)移，病人的預(yù)后及生存期，對化療及生物藥物的藥效及預(yù)后有著有效和準(zhǔn)確的評價(jià)。

1.7.2腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測
為提高腫瘤標(biāo)志物的輔助診斷價(jià)值，通�？蛇M(jìn)行腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測�，F(xiàn)在對腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測有兩種意見，一種是通過嚴(yán)格篩選、科學(xué)分析后進(jìn)行腫瘤標(biāo)志物的組合，以有針對性地進(jìn)行檢測；另一種是利用生物芯片技術(shù)，將目前能用于診斷的腫瘤標(biāo)志物盡可能點(diǎn)在一張芯片上進(jìn)行檢測，以充分獲得信息，提高診斷的靈敏度[22-23]。因而，未來腫瘤標(biāo)志物領(lǐng)域的研究將轉(zhuǎn)向通過將高通量檢測技術(shù)應(yīng)用于一系列的腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合來檢測代替單個(gè)或少數(shù)幾個(gè)腫瘤標(biāo)志物檢測，并且結(jié)合臨床提高聯(lián)合診斷的檢出率和準(zhǔn)確率。

1.7.3分子腫瘤標(biāo)志物、循環(huán)腫瘤細(xì)胞及高通量測序
從分子生物學(xué)角度，一般認(rèn)為人類癌癥是由癌基因和腫瘤抑制基因突變積累造成的，包括基因點(diǎn)突變、重排、缺失、甲基化、擴(kuò)增和插入等。目前在國際上已經(jīng)用于臨床診斷的常見基因類腫瘤標(biāo)志物主要是個(gè)性化用藥體細(xì)胞突變相關(guān)指標(biāo)、DNA甲基化指標(biāo)兩類。

國內(nèi)已經(jīng)注冊的基因類腫瘤標(biāo)志物有多個(gè)指標(biāo)。比如個(gè)性化用藥相關(guān)的EGFR、K-RAS、B-RAF、ALK突變檢測試劑等，也有與早期診斷相關(guān)的甲基化標(biāo)志物如Septin 9。另外2015年CFDA還批準(zhǔn)了首個(gè)microRNA相關(guān)的胰腺癌檢測試劑盒--微小核糖核酸（microRNA-25）定性檢測試劑盒（熒光PCR法）。該試劑盒由江蘇命碼生物科技有限公司研制和生產(chǎn)的。預(yù)計(jì)未來幾年個(gè)性化用藥相關(guān)分子指標(biāo)和甲基化指標(biāo)會有越來越多的新產(chǎn)品上市。

國外還上市了一類檢測多個(gè)基因表達(dá)譜用作腫瘤的預(yù)后及療效評估。比如OncotypeDx®和 Mammaprint®產(chǎn)品分別檢測與乳腺癌治療效果和藥物選擇相關(guān)的21個(gè)和70個(gè)基因的表達(dá)。這類產(chǎn)品已經(jīng)在國外廣泛使用。但由于法規(guī)等各種原因，國內(nèi)尚未有產(chǎn)品注冊。

近年來，循環(huán)腫瘤細(xì)胞和循環(huán)核酸檢測也是研究的一個(gè)熱點(diǎn)。該類技術(shù)有時(shí)被俗稱為"液體活檢"。CFDA 2012年批準(zhǔn)了強(qiáng)生公司的cellsearch®系統(tǒng)用于體外定量檢測轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者全血中的上皮起源型(CD45-、EpCAM+、以及細(xì)胞角蛋白8、18+、及/或19+)循環(huán)細(xì)胞(CTC)。預(yù)計(jì)今后會有更多的產(chǎn)品注冊上市。

在新技術(shù)上，無疑高通量測序NGS是最近幾年最為耀眼的一個(gè)明顯技術(shù)。已經(jīng)有大量的研究嘗試把NGS用在腫瘤的檢測領(lǐng)域，包括腫瘤易感相關(guān)的SNPs、個(gè)性化用藥相關(guān)體細(xì)胞突變表達(dá)等。由于NGS涉及的指標(biāo)眾多，一個(gè)檢測可能包含幾十到幾百個(gè)指標(biāo)。按照法規(guī)來進(jìn)行臨床驗(yàn)證和注冊有非常大的困難。迄今為止CFDA尚未批準(zhǔn)任何產(chǎn)品上市。預(yù)計(jì)今后還需要與政府監(jiān)管部門協(xié)商如何解決這類創(chuàng)新技術(shù)的法規(guī)適用性問題。

總之，未來腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展最為活躍的領(lǐng)域?qū)�從血清腫瘤標(biāo)志物轉(zhuǎn)移到各種基因分子標(biāo)志物上來。技術(shù)方法上，血清腫瘤標(biāo)志物的各種發(fā)光檢測平臺已經(jīng)基本能滿足臨床的需求。但分子診斷方面將會蓬勃發(fā)展，各種新技術(shù)也會層出不窮。（作者：全國體外診斷網(wǎng)、上海透景生命科技股份有限公司董事長: 姚見兒）