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一、概述
發(fā)光檢測(cè)作為分析化學(xué)領(lǐng)域內(nèi)一個(gè)強(qiáng)有力的技術(shù)手段，始終以其高靈敏度、低成本、簡(jiǎn)單快速的優(yōu)勢(shì)發(fā)揮著重要作用，對(duì)于某些特定化合物（如有機(jī)磷農(nóng)藥和神經(jīng)毒劑）、某些酶活性、金屬離子等的動(dòng)態(tài)分析和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)具有不可替代的優(yōu)勢(shì)。從上世紀(jì)中葉開始，生物醫(yī)學(xué)界一直在致力于將該技術(shù)體系應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室研究中，并取得了巨大成功。例如：利用化學(xué)發(fā)光測(cè)定血清和組織中的超氧化物歧化酶（SOD），利用細(xì)菌螢光素酶（LUX）系統(tǒng)檢測(cè)樣本中極少量的微生物，利用螢火蟲螢光素酶（LUC）系統(tǒng)高靈敏度檢測(cè)細(xì)胞活性或細(xì)胞殺傷效果以替代傳統(tǒng)的MTT實(shí)驗(yàn)等等，至今仍然屬于先進(jìn)技術(shù)。

上世紀(jì)八十年代末，化學(xué)發(fā)光自顯影技術(shù)的出現(xiàn)，逐步替代放射自顯影，應(yīng)用于免疫組化和原位雜交等分子病理學(xué)技術(shù)、DNA指紋圖、酶切圖譜等技術(shù)在臨床診斷、法醫(yī)物證、病原體分型等領(lǐng)域，尤其是化學(xué)發(fā)光技術(shù)在常規(guī)免疫分析（Immunoassay）領(lǐng)域內(nèi)的應(yīng)用，直接推動(dòng)了臨床實(shí)驗(yàn)室定量化和自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步。

上世紀(jì)九十年代，英國(guó)Amersham公司在全球率先開發(fā)化學(xué)發(fā)光自顯影底物和標(biāo)記技術(shù)，并在國(guó)際上首先推出第一款化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器和相關(guān)試劑，被國(guó)內(nèi)廠家引進(jìn)并應(yīng)用于臨床。作為上述技術(shù)的核心，基于過(guò)氧化物酶的化學(xué)發(fā)光增敏劑的誕生起到了關(guān)鍵的作用，其中第一代增敏劑-對(duì)位取代酚類的發(fā)現(xiàn)者Larry J Kricka，英國(guó)劍橋大學(xué)和美國(guó)賓夕法尼亞大學(xué)教授，先后任美國(guó)臨床化學(xué)學(xué)會(huì)（AACC）主席，國(guó)際生物和化學(xué)發(fā)光學(xué)會(huì)（ISBC）主席。其后美國(guó)密歇根大學(xué)等單位相繼合成了基于堿性磷酸酶的發(fā)光底物AMPPD及其衍生物，從而與前述增敏劑共同奠定了酶促發(fā)光系統(tǒng)的技術(shù)基礎(chǔ)。該底物系列分別被美國(guó)Lumigen公司和Tropix公司（后被ABI并購(gòu)）迅速實(shí)現(xiàn)了商品化，引發(fā)了幾年后化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)如雨后春筍般的誕生和廣泛臨床應(yīng)用，國(guó)內(nèi)外眾多知名品牌的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)依然在使用該類發(fā)光底物。

根據(jù)美國(guó)病理�？漆t(yī)師學(xué)會(huì)(The College of American Pathologists，CAP) 的統(tǒng)計(jì)，目前全球有超過(guò)30家大型全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器的廠商，具有超過(guò)60個(gè)免疫自動(dòng)化化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)。該系統(tǒng)發(fā)展趨勢(shì)為檢驗(yàn)儀器的實(shí)驗(yàn)室集成化、系列化、智能化。檢測(cè)試劑項(xiàng)目涵蓋傳染病、心臟標(biāo)志物、腫瘤標(biāo)志物、甲狀腺功能、性腺激素、代謝物質(zhì)、藥物濃度、肝炎、先天性疾病、肝纖維化、優(yōu)生優(yōu)育、高血壓、炎癥和過(guò)敏原等系列百余種檢測(cè)試劑。

20世紀(jì)60年代末，國(guó)內(nèi)引入了免疫沉淀試驗(yàn)技術(shù)，開創(chuàng)了我國(guó)抗原抗體檢測(cè)的先河。當(dāng)時(shí)采用瓊脂免疫擴(kuò)散、對(duì)流免疫電泳、免疫放射電泳自顯影等方法，其特異性和敏感性均較差。70年代初，采用間接免疫凝集試驗(yàn)技術(shù)，如間接血凝試驗(yàn)(IHO)、免疫粘連血凝試驗(yàn)(IAHA)、乳膠凝集試驗(yàn)等，使檢測(cè)的敏感性和特異性有所提高，但仍然滿足不了臨床診斷和防治的需求。隨著科技進(jìn)步，免疫學(xué)檢測(cè)發(fā)展迅速，尤以標(biāo)記免疫分析最為顯著，如酶聯(lián)免疫技術(shù)、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)、時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定技術(shù)、熒光偏振免疫分析測(cè)定技術(shù)等。進(jìn)入新的世紀(jì)，伴隨著生物學(xué)及光機(jī)電相關(guān)技術(shù)應(yīng)用的不斷發(fā)展，全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)系統(tǒng)不斷普及和推廣，大幅提高了檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度，使得實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化得以實(shí)現(xiàn)。

二、原理及分類
自然界有物理發(fā)光，化學(xué)發(fā)光和生物發(fā)光三種發(fā)光類型，狹義的發(fā)光免疫分析，主要指化學(xué)發(fā)光�；瘜W(xué)發(fā)光系氧化化學(xué)反應(yīng)，電子激發(fā)后回到基態(tài)以光子的形式釋放能量，利用釋放的光子個(gè)數(shù)反映化學(xué)反應(yīng)的強(qiáng)度，常用的發(fā)光劑為氨基苯二酰肼(異魯米諾和魯米諾)、吖啶酯類和金剛烷衍生物。自1976年Schroeder利用異魯米諾標(biāo)記生物素進(jìn)行化學(xué)發(fā)光測(cè)定以來(lái)，化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)得到迅速發(fā)展，并逐步發(fā)展了酶促化學(xué)發(fā)光疫分析技術(shù)，直接化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)和電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)。因?yàn)槠潇`敏度高，特異性強(qiáng)，檢測(cè)范圍寬，試劑穩(wěn)定和無(wú)放射性污染等優(yōu)點(diǎn)得以在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上廣泛推廣，主要應(yīng)用于微孔板式和磁微粒免疫化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)上。

化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)系統(tǒng)的發(fā)展主要圍繞在固相載體和發(fā)光體系兩大核心技術(shù)的不斷發(fā)展和完善:①采用的固相載體有塑膠微粒、超順磁微粒、彈性塑料管、塑料珠等，其中磁微粒具有包被量大，易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化的優(yōu)勢(shì)。轉(zhuǎn)盤式化學(xué)發(fā)光免疫分析儀主要采用微米級(jí)超順磁微粒作為固相載體，通過(guò)化學(xué)鍵直接將生物活性物質(zhì)連接在磁微粒表面；或者采用鏈霉素－生物素、熒光素－熒光素抗體體系連接生物活性物質(zhì)。②采用的化學(xué)發(fā)光體系有酶促化學(xué)發(fā)光、直接化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光三種，化學(xué)發(fā)光分類及代表性廠家詳見表1。其中酶促化學(xué)發(fā)光分為辣根酶體系和堿磷酶體系，直接化學(xué)發(fā)光法主要有吖啶酯、異魯米諾發(fā)光體系。

表1 化學(xué)發(fā)光免疫分析分類及代表性廠家

三、國(guó)內(nèi)外化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器和試劑
化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)興起于20世紀(jì)80年代，目前在歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)成為了臨床實(shí)驗(yàn)室廣泛使用的常規(guī)檢測(cè)技術(shù)。近些年，我國(guó)化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)處于快速發(fā)展階段，市場(chǎng)上應(yīng)用的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)產(chǎn)品大部分為進(jìn)口產(chǎn)品。

我國(guó)化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)的產(chǎn)業(yè)研究和應(yīng)用處于發(fā)展期，與歐美等先進(jìn)國(guó)家相比尚有差距，但差距在迅速縮小。國(guó)內(nèi)化學(xué)發(fā)光技術(shù)經(jīng)歷了由微孔板式化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)到磁微�；瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)的發(fā)展歷程。微孔板式化學(xué)發(fā)光儀器和試劑是化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)在我國(guó)免疫診斷產(chǎn)業(yè)中獨(dú)特的產(chǎn)品形式，至今仍以其檢測(cè)通量大，產(chǎn)品性價(jià)比高而在市場(chǎng)中占有獨(dú)特的地位。代表廠家有鄭州安圖生物、北京引航、石家莊華洋、北京科美、北京源德、北京泰格科信、北京量質(zhì)、北京華科泰等；磁微�；瘜W(xué)發(fā)光儀器和試劑是化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)在我國(guó)免疫診斷產(chǎn)業(yè)中處于導(dǎo)入進(jìn)入高速成長(zhǎng)期的階段，代表廠家有鄭州安圖生物、深圳新產(chǎn)業(yè)、威海威高、四川邁克、北京利德曼、蘇州達(dá)成、深圳邁瑞、蘇州長(zhǎng)光華醫(yī)等。以下就國(guó)內(nèi)外化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)系統(tǒng)生產(chǎn)商及其主要產(chǎn)品進(jìn)行介紹:

1．國(guó)內(nèi)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器和試劑
1.1微孔板式化學(xué)發(fā)光儀器及試劑
1.1.1北京引航醫(yī)學(xué)生物技術(shù)研究所

1996年，北大人民醫(yī)院楊曉林教授創(chuàng)立的北京引航醫(yī)學(xué)生物技術(shù)研究所，在國(guó)內(nèi)率先進(jìn)行化學(xué)發(fā)光底物、半自動(dòng)儀器和試劑的研究，于同年獲得半自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀注冊(cè)證，建立了微孔板化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)。

1.1.2鄭州安圖生物工程股份有限公司
1998年，苗擁軍創(chuàng)立了鄭州安圖生物工程股份有限公司，完善了包括化學(xué)發(fā)光底物、試劑、軟件和儀器的微孔板式化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)，是國(guó)內(nèi)第一個(gè)取得AFP和CEA等腫瘤標(biāo)志物化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑注冊(cè)證的廠家，并逐步形成了肝炎、傳染病、性激素、甲狀腺功能、腫瘤標(biāo)志物、高血壓、肝纖維化、糖尿病、產(chǎn)前篩查等46種試劑品種。

1.1.3石家莊華洋分析儀器有限公司
1998年，郝書順創(chuàng)立了石家莊華洋分析儀器有限公司，于當(dāng)年取得半自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀注冊(cè)證，并生產(chǎn)和銷售微孔板式化學(xué)發(fā)光儀器。

1.1.4北京科美生物技術(shù)有限公司
1999年，應(yīng)希堂創(chuàng)立了北京科美生物技術(shù)有限公司，主要生產(chǎn)微孔板式化學(xué)發(fā)光試劑。

1.1.5北京源德生物醫(yī)學(xué)工程有限公司
2001年，吳曉東創(chuàng)立了北京源德生物醫(yī)學(xué)工程有限公司，2004年向市場(chǎng)推出了微孔板式化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)及試劑，擁有檢驗(yàn)設(shè)備及試劑的研發(fā)和生產(chǎn)，2003年，SARS爆發(fā)，獲得了首個(gè)SARS檢測(cè)試劑文號(hào)。

1.1.6北京泰格科信生物科技有限公司
2004年，劉麗創(chuàng)立了北京泰格科信生物科技有限公司，進(jìn)行微孔板式發(fā)光儀和試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。

1.1.7北京量質(zhì)科技有限公司
2006年，趙作勇創(chuàng)立了北京量質(zhì)科技有限公司，進(jìn)行微孔板式發(fā)光儀的研發(fā)和生產(chǎn)。

1.1.8北京華科泰生物技術(shù)有限公司
2007年，楊國(guó)平創(chuàng)立了北京華科泰生物技術(shù)有限公司，主要生產(chǎn)微孔板式化學(xué)發(fā)光試劑。

另外其它化學(xué)發(fā)光儀器和（或）試劑生產(chǎn)廠家如中生北控、北方所、北京科衛(wèi)、廈門波生、福建洪誠(chéng)、濰坊康華、廣州虹業(yè)等涉及部分微孔板式化學(xué)發(fā)光試劑的研發(fā)和生產(chǎn)；北京濱松、煙臺(tái)艾德康、深圳愛康、重慶科斯邁生物技術(shù)有限公司涉及微孔板化學(xué)發(fā)光儀器的研發(fā)和生產(chǎn)。

1.2磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器及試劑
1.2.1鄭州安圖生物工程股份有限公司
鄭州安圖生物工程股份有限公司成立于1998年，創(chuàng)始人苗擁軍，2011年3月推出中國(guó)第一臺(tái)對(duì)單個(gè)反應(yīng)杯進(jìn)行管理的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑�，F(xiàn)有儀器產(chǎn)品A2000，試劑品種涵蓋肝炎、傳染病、優(yōu)生優(yōu)育、性激素、甲狀腺功能、腫瘤標(biāo)志物、心臟標(biāo)志物、高血壓、肝纖維化、生長(zhǎng)激素、糖尿病、炎癥、結(jié)核、骨代謝、產(chǎn)前篩查、貧血、自免肝等系列項(xiàng)目，其中乙肝五項(xiàng)定量、戊肝IgG和IgM、含直接腎素測(cè)定的高血壓五項(xiàng)等系列項(xiàng)目是中國(guó)首家推出并成功應(yīng)用的產(chǎn)品。

1.2.2深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司
1995年，饒微創(chuàng)立了深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司，2010年11月推出中國(guó)第一臺(tái)基于六孔反應(yīng)條進(jìn)行管理的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑�，F(xiàn)有儀器產(chǎn)品Maglumi1000、Maglumi2000、Maglumi2000PLUS，試劑品種涵蓋性激素、甲狀腺功能、腫瘤標(biāo)志物、心血管及心肌標(biāo)志物、傳染病、炎癥、藥物監(jiān)測(cè)、產(chǎn)前篩查、優(yōu)生優(yōu)育、貧血、代謝等項(xiàng)目。

1.2.3威海威高生物科技有限公司
2005年，陳學(xué)利創(chuàng)立了威海威高生物科技有限公司，2011年4月推出轉(zhuǎn)盤式全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光AutolumiS3000儀器及傳染病試劑等。

1.2.4四川邁克生物科技股份有限公司
1994年，唐勇創(chuàng)立了四川邁克生物科技股份有限公司，2011年10月推出磁微粒全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光IS1200儀器及試劑。

1.2.5北京利德曼生化股份有限公司
1997年，沈廣仟?jiǎng)?chuàng)立了北京利德曼生化股份有限公司，2012年10月推出磁微粒全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光CI1000儀器及配套試劑。

1.2.6蘇州達(dá)成生物科技（蘇州）有限公司
2011年，劉勁創(chuàng)立了蘇州達(dá)成生物科技（蘇州）有限公司，2012年10月推出磁微粒全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光Aulia200儀器及試劑。

1.2.7深圳邁瑞生物科技股份有限公司
1991年，孫國(guó)華創(chuàng)立了深圳邁瑞生物科技股份有限公司，2013年7月推出磁微粒全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光CL-2000i儀器及試劑。

1.2.8蘇州長(zhǎng)光華醫(yī)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司
2011年，董建華創(chuàng)立了蘇州長(zhǎng)光華醫(yī)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司，2014年4月推出磁微粒全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光AE240儀器及配套試劑。

其他中國(guó)公司，如上�？迫A、北京萬(wàn)泰等都在磁微粒全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光領(lǐng)域進(jìn)行拓展與嘗試。采用磁微�；瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)，將免疫磁珠體系、化學(xué)發(fā)光體系與免疫反應(yīng)體系相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)免疫自動(dòng)化，其檢測(cè)原理與國(guó)外主流產(chǎn)品相似。

2．國(guó)外主流化學(xué)發(fā)光儀器和試劑現(xiàn)狀分析
2.1雅培診斷(Abbott Diagnostics) Architect新一代免疫發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)采用吖啶酯標(biāo)記與磁微粒技術(shù)，單機(jī)檢測(cè)速度為200測(cè)試/小時(shí)�；瘜W(xué)發(fā)光免疫診斷試劑品種涵蓋腫瘤標(biāo)志物、心臟標(biāo)志物、肝炎、傳染病、代謝、藥物監(jiān)測(cè)、性激素、甲狀腺功能、優(yōu)生優(yōu)育等項(xiàng)目。

2.2貝克曼(Beckman Coulter)系統(tǒng)作為中國(guó)市場(chǎng)免疫診斷系統(tǒng)主要供應(yīng)商之一， Access/Access2免疫診斷系統(tǒng)于2001年面世。該系統(tǒng)采用磁微粒與AMPPD技術(shù)，測(cè)試速度100測(cè)試/小時(shí)。UniCel DxI 800系統(tǒng)整合了4套Access 2進(jìn)樣系統(tǒng)，單機(jī)測(cè)試速度為400測(cè)試/小時(shí)。化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑品種涵蓋腫瘤標(biāo)志物、心臟標(biāo)志物、性激素、甲狀腺功能、貧血、腎上腺、過(guò)敏原、產(chǎn)前篩查等項(xiàng)目。

2.3羅氏診斷( Roche Diagnostics)免疫分析是電化學(xué)發(fā)光技術(shù)持有者，羅氏診斷Elecsys 2010在1996年面世，整合電化學(xué)發(fā)光技術(shù)、磁微粒技術(shù)、鏈霉素－生物素技術(shù)，檢測(cè)速度70測(cè)試/小時(shí)。2006年，推出了cobas e601電化學(xué)發(fā)光免疫分析模塊。電化學(xué)發(fā)光免疫診斷試劑品種涵蓋腫瘤標(biāo)志物、心臟標(biāo)志物、肝炎、傳染病、骨質(zhì)疏松、性激素、甲狀腺功能、貧血等項(xiàng)目。

2.4 西門子診斷( Siemens Healthcare Diagnostics)是免疫分析自動(dòng)化的后起之秀，2007年1月1日，拜耳醫(yī)藥保健集團(tuán)診斷部與西門子公司于2006年7月收購(gòu)的DPC(美國(guó)診斷試劑公司)被合并為一個(gè)獨(dú)立的業(yè)務(wù)部門，在全球免疫診斷試劑市場(chǎng)居第二位。ADVIA Centaur CP Immunoassay System/2005，ADVIA Centaur XP/2006 屬于拜耳醫(yī)藥的兩款結(jié)構(gòu)不同的儀器，均采用吖啶酯技術(shù)和磁微粒技術(shù)，ADVIA Centaur CP 測(cè)試速度180測(cè)試/小時(shí)；ADVIA Centaur XP測(cè)試速度240測(cè)試/小時(shí)。1998年，DPC推出的IMMULITE 2000， 2004推出IMMULITE 2500 SMS�；瘜W(xué)發(fā)光免疫診斷試劑品種涵蓋性激素、甲狀腺功能、腫瘤標(biāo)志物、心臟標(biāo)志物、感染性疾病、骨代謝、貧血、過(guò)敏原、藥物濃度、細(xì)胞因子等項(xiàng)目。

四、前景展望
近年來(lái)，化學(xué)發(fā)光免疫分析方法及應(yīng)用研究發(fā)展異常迅速，并以其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)在生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷、食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)等方面得到了廣泛應(yīng)用，特別是磁性微粒子的免疫分離技術(shù)、金納米粒子的催化功能以及化學(xué)發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移在CLIA方法中的應(yīng)用。但是，CLIA在實(shí)際應(yīng)用中仍然存在不足，例如儀器體積過(guò)大，實(shí)際樣品基質(zhì)的干擾，小分子檢測(cè)重復(fù)性較差等。為了使CLIA得到更加廣泛的應(yīng)用，未來(lái)研究的主要方向應(yīng)集中在以下幾個(gè)方面:(1)分析儀器的大通量化與流水線化；(2)降低儀器成本，使儀器微型化、便攜化；(3)強(qiáng)化對(duì)檢測(cè)樣本基質(zhì)的處理，減少非特異性吸附，提高檢測(cè)的穩(wěn)定性；(4)在高通量研究方面，完善多通道、多組分CLIA檢測(cè)技術(shù)，提高檢測(cè)效率；(5)發(fā)展CLIA的聯(lián)用技術(shù)，擴(kuò)大應(yīng)用范圍。

全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀器和試劑是臨床免疫學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域未來(lái)發(fā)展的必然趨勢(shì)，國(guó)外生產(chǎn)商已做得相對(duì)成熟，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)商的道路雖然曲折但充滿光明和希望。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展及國(guó)內(nèi)科研工作者的不懈努力，國(guó)產(chǎn)免疫自動(dòng)化儀器和試劑將會(huì)更加穩(wěn)定和可靠，化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)將會(huì)得到更快速的發(fā)展和更廣泛的應(yīng)用。（作者：全國(guó)體外診斷網(wǎng)、鄭州安圖生物工程股份有限公司總經(jīng)理：苗擁軍）