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在醫(yī)療實踐中，金黃色葡萄球菌的準確鑒定至關重要。作為常見的革蘭氏陽性球菌，其廣泛分布于生活環(huán)境中，可能引發(fā)從輕微皮膚癤腫到嚴重肺炎、敗血癥等多種感染疾病，對患者健康構成嚴重威脅。血漿凝固酶實驗則是識別該 “危險分子” 的關鍵手段。

當面臨試劑供應短缺問題時，基層醫(yī)院可采用自制血漿凝固酶實驗試劑的方法。

1.試劑配置：精準挑選輸血八項檢測均為陰性的抗凝血漿樣本，吸取適量至試管，滴入數(shù)滴亞甲藍染液，輕輕晃動使其混勻。

2.玻片準備：在潔凈的玻片上加 1 滴 9g/L 氯化鈉溶液（生理鹽水）。

3.菌懸液制作：用接種環(huán)挑取適量細菌放入生理鹽水中，攪拌混合制成菌懸液，持續(xù)混勻 10 - 20 秒，確認無凝集后進行下一步操作。

4.試劑添加與觀察：加入一環(huán)新配制的血漿凝固酶試劑并迅速混勻，若在 5 - 10 秒內(nèi)出現(xiàn)凝集現(xiàn)象則判定為陽性，未凝集則為陰性。

1.血漿稀釋：將精心挑選的輸血八項檢測皆為陰性的抗凝血漿樣本用生理鹽水按 1:4 的比例進行稀釋，取 0.5ml 稀釋后的血漿放入試管中。

2.加菌懸液：向上述試管中加入 0.5ml 待測菌的濃菌懸液。

3.混勻與孵育：輕輕振蕩試管使管內(nèi)液體充分混勻，然后將試管置于 37℃的恒溫水浴箱中。

4.結果觀察：每 30 分鐘取出試管觀察一次結果。若 3 小時內(nèi)試驗管內(nèi)出現(xiàn)凝固現(xiàn)象則為陽性；若 3 小時內(nèi)試管無反應，繼續(xù)觀察至 24 小時，仍未凝固則確定為陰性結果；若觀察到試管內(nèi)有明顯凝塊形成或整管凝集，同樣判定為陽性。

無論是玻片法還是試管法，為確保結果的準確性，均需設置陰陽對照管。陽性對照采用已知血漿凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌菌株，陰性對照可選用不產(chǎn)生血漿凝固酶的表皮葡萄球菌菌株或生理鹽水替代。

自制的血漿凝固酶試劑靈活性良好，既可以現(xiàn)配現(xiàn)用以滿足緊急檢測需求，也可密封后放置在 2 - 8℃冰箱保存，在此條件下試劑約半月內(nèi)有效，這種經(jīng)濟實惠的方式符合基層醫(yī)院的實際情況和需求。

除金黃色葡萄球菌外，中間葡萄球菌、豬葡萄球菌、施氏葡萄球菌等在血漿凝固酶和過氧化氫試驗中也可能呈陽性，因此需要綜合判斷。

金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌菌落較大，直徑在 2 - 3 毫米以上，呈鮮明金黃色，質(zhì)地光滑濕潤，邊緣整齊圓潤，凸起且有光澤，在血平板上常呈現(xiàn) β 溶血現(xiàn)象，初步識別相對容易，但確診仍需結合生化試驗。中間葡萄球菌菌落較小，呈白色或米色，表面較光滑、邊緣整齊，一般不溶血或呈 α 溶血。豬葡萄球菌菌落為灰白色，質(zhì)地粗糙，有輕微隆起，邊緣不平整，多為 γ 溶血。施氏葡萄球菌菌落呈淡黃色，圓形規(guī)則，表面有一定光澤且大小適中，通常不溶血或呈弱 α 溶血。這些菌落及溶血特征雖可作為鑒別參考，但由于存在相似性，務必綜合多種檢測結果進行判斷，防止誤判。

盡管基層醫(yī)院在醫(yī)療資源和試劑配備方面常常受到限制，但這絕不能成為降低醫(yī)療質(zhì)量與檢測準確性的借口。通過自制試劑并嚴格遵循操作流程，基層醫(yī)院能夠精準檢測金黃色葡萄球菌，為臨床診療提供有力的支持，切實守護患者的健康。

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