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免疫學(xué)檢測的干擾因素和處理策略專家共識

更新時間:2024/12/29 12:03:25 瀏覽次數(shù):14886

免疫學(xué)檢測是一種通過抗原與抗體的相互作用來對樣本中的分析物進(jìn)行定性或定量分析的技術(shù)。盡管這種檢測方法在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中扮演著重要角色,但它的結(jié)果可能會受到多種因素的干擾,這些干擾因素貫穿于檢測的全過程,包括分析前、分析中和分析后。北京醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會和上海市醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會的專家們基于國內(nèi)外的研究結(jié)果,結(jié)合他們的專業(yè)意見,就免疫學(xué)檢測中的干擾因素及其應(yīng)對策略達(dá)成了共識,旨在為免疫學(xué)檢測的精確性提供科學(xué)依據(jù)。

共識一:

應(yīng)及時準(zhǔn)確識別可能存在的干擾因素。




當(dāng)免疫學(xué)檢測結(jié)果與臨床預(yù)期不符、不同品牌或批號的試劑盒給出不一致的結(jié)果、出現(xiàn)極端值、動態(tài)監(jiān)測結(jié)果存在矛盾、相關(guān)項(xiàng)目間的檢測結(jié)果相互矛盾或稀釋后回收率低時,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)考慮可能存在干擾因素。以下是一些常用的識別和處理方法:


1. 識別干擾因素的常用方法:


• 使用具有不同結(jié)合位點(diǎn)的其他方法或來自不同物種的抗體進(jìn)行復(fù)測,通過比較兩種方法的結(jié)果來判斷是否存在干擾。


• 采用不同的檢測系統(tǒng)進(jìn)行重測,但需注意不同檢測平臺之間可能存在的差異。


• 使用動物血清或?qū)S孟♂屢簩颖具M(jìn)行梯度稀釋,如果待測物濃度的變化不成比例,則表明可能存在干擾物。需要注意的是,干擾物并不總是以預(yù)期的方式影響稀釋后的結(jié)果,一些非特異性結(jié)合物質(zhì),如非特異性抗體、干擾蛋白、非特異性試劑成分,可能會在實(shí)驗(yàn)中與待測物非特異性結(jié)合,其影響可能隨著稀釋倍數(shù)的增加而減少。


2. 識別自身抗體或嗜異性抗體:


• 直接檢測樣本中是否存在自身抗體或嗜異性抗體。


• 使用阻斷法,即用多個物種來源或不同濃度的阻斷劑處理樣本后再進(jìn)行檢測,通過比較阻斷前后的結(jié)果來判斷是否存在嗜異性抗體或人抗動物抗體的干擾。同時,需要注意阻斷劑本身可能對待測物產(chǎn)生的影響。


3. 識別大分子干擾物:


• 混合法:在鑒別巨分子TSH等大分子干擾物時,可以將患者的樣本與已知甲減患者的樣本混合,如果甲減患者的TSH回收率在85%~97%之間,則提示存在巨分子TSH。


• 沉淀回收試驗(yàn):使用聚乙二醇(PEG)6000沉淀樣本后進(jìn)行回收試驗(yàn),如果回收率低于40%,則表明可能存在大分子蛋白干擾。對于高敏心肌肌鈣蛋白I(hs-cTnI),回收率低于20%可能提示存在大分子復(fù)合物干擾。


• Protein A/G處理:使用Protein A/G處理樣本后進(jìn)行回收試驗(yàn),如果患者樣本的回收率低于對照樣本,則表明可能存在大分子復(fù)合物干擾。


• 凝膠過濾層析法:作為鑒別大分子干擾物的金標(biāo)準(zhǔn)方法,如鑒別巨分子TSH和巨泌乳素。需要注意的是,陰性結(jié)果不能排除干擾,而陽性結(jié)果則可能表明存在干擾。在懷疑存在干擾時,可以使用兩種以上的方法進(jìn)行測試,以排除干擾因素或識別干擾物。


內(nèi)源性干擾因素及其處理措施


內(nèi)源性干擾因素主要涵蓋兩類干擾機(jī)制。


其一,能夠改變樣本里待測物的濃度,進(jìn)而干擾檢測結(jié)果,像自身抗體、激素結(jié)合蛋白就屬于此類;


其二,通過干擾抗原與抗體之間的結(jié)合過程,對檢測結(jié)果造成影響,例如類風(fēng)濕因子、嗜異性抗體以及人抗動物抗體等。在免疫學(xué)方法運(yùn)用過程中,這些內(nèi)源性干擾因素可能會使檢測結(jié)果出現(xiàn)正向或負(fù)向的偏差。所以,檢驗(yàn)技術(shù)人員必須深入了解內(nèi)源性干擾因素的作用機(jī)制,在標(biāo)本檢測的前、中階段,盡可能降低其對檢測結(jié)果的不利影響。

共識二:

可從預(yù)防和方法學(xué)改進(jìn)2個方面入手,降低類風(fēng)濕因子對免疫學(xué)檢測的干擾




類風(fēng)濕因子,它屬于自身抗體的范疇,其靶抗原是變性免疫球蛋白(Ig)G 的 Fc 片段。在檢測時,它能夠與二抗以及捕獲抗體的 Fc 段相結(jié)合。特別是運(yùn)用捕獲法測定 IgM 抗體的情境下,類風(fēng)濕因子容易和 Ig 發(fā)生聚集現(xiàn)象,最終致使檢測結(jié)果呈現(xiàn)假陽性。不過,要是類風(fēng)濕因子僅僅與信號抗體或者捕獲抗體結(jié)合,就會產(chǎn)生空間位阻,阻擋捕獲抗體 - 抗原 - 信號抗體復(fù)合物正常形成,使得檢測信號減弱,引發(fā)假陰性結(jié)果。在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)夾心法試驗(yàn)環(huán)節(jié),類風(fēng)濕因子會和固相抗體結(jié)合,接著再與酶結(jié)合物發(fā)生顯色反應(yīng),從而造成假陽性結(jié)果。相關(guān)研究表明,類風(fēng)濕因子對 ELISA 檢測諸如 D - 二聚體、乙型肝炎標(biāo)志物、TSH、cTnI、甲狀腺激素(TH)、性激素結(jié)合球蛋白、脂肪酶、TORCH IgM 抗體、糖類抗原(CA)19 - 9 等指標(biāo)時,會產(chǎn)生極為明顯的干擾。另外,類風(fēng)濕因子對免疫比濁法的干擾主要出現(xiàn)在反應(yīng)的第二步,它會促進(jìn)抗原、抗體復(fù)合物聚集,使得檢測結(jié)果出現(xiàn)假性增高情況。需要注意的是,針對不同的檢測體系,類風(fēng)濕因子引發(fā)干擾的機(jī)制與程度各異,并且這種干擾和其自身濃度并沒有直接關(guān)聯(lián)。


1、預(yù)防措施


類風(fēng)濕因子與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、EB 病毒感染等病癥聯(lián)系緊密。鑒于此,在檢測過程中,務(wù)必緊密結(jié)合患者的病史資料以及其他實(shí)驗(yàn)室檢測所得結(jié)果,全方位綜合考量,以此精準(zhǔn)分析類風(fēng)濕因子是否對最終檢測結(jié)果造成干擾,從而保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。


2、方法學(xué)優(yōu)化
1)試劑籌備環(huán)節(jié):
選用 F(ab')2 替換完整的 IgG,如此一來,便能有效規(guī)避類風(fēng)濕因子與試劑中相關(guān)抗體片段的非特異性結(jié)合,減少干擾因素。
2)標(biāo)本檢測階段:
① 借助阻斷試管采集標(biāo)本,或者向標(biāo)本中添加封閉阻斷劑,利用其特性吸附標(biāo)本內(nèi)的類風(fēng)濕因子,最大程度降低其對檢測的不良影響;
② 運(yùn)用 25% PEG6000 沉淀類風(fēng)濕因子,先振蕩混勻 10 秒,再以 10000×g 的離心力離心 5 分鐘,最后取上清液用于檢測,通過這種預(yù)處理方式去除類風(fēng)濕因子,提升檢測精度;
③ 采用 0.9% NaCl 溶液預(yù)先稀釋樣本,稀釋過程可有效減少類風(fēng)濕因子在 IgM 抗體檢測時產(chǎn)生的干擾,確保檢測信號真實(shí)可靠;
④ 在樣本稀釋液里添加經(jīng)熱變性處理的 IgG,利用熱變性 IgG 與類風(fēng)濕因子的結(jié)合特性,阻止類風(fēng)濕因子干擾正常檢測反應(yīng);
⑤ 將動物血清、抗人 IgM 或抗人 IgG 加入標(biāo)本之中,借助這些外源性物質(zhì)與類風(fēng)濕因子的相互作用,降低其干擾作用;
⑥ 添加 2 - 巰基乙醇(終濃度為 0.1 mol・L⁻¹),該物質(zhì)能夠特異性地降解 IgM 型類風(fēng)濕因子,避免其對檢測體系的破壞。


此外,臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)強(qiáng)化與試劑品牌方的溝通協(xié)作,攜手探尋更多行之有效的干擾應(yīng)對方案,持續(xù)優(yōu)化檢測流程。


共識三:

人抗動物抗體和嗜異性抗體對免疫學(xué)檢測的干擾類似,可通過相似的途徑減少干擾




嗜異性抗體與人抗動物抗體
嗜異性抗體是人體自發(fā)產(chǎn)生的一類特殊抗體,它具備與其他動物 Ig 相結(jié)合的能力,其作用機(jī)制是通過結(jié)合 IgG 的 Fc 段,進(jìn)而與檢測系統(tǒng)中的標(biāo)記抗體或捕獲抗體發(fā)生相互作用,最終導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性或假陰性的偏差。在實(shí)際檢測中,嗜異性抗體會對人絨毛膜促性腺激素(HCG)、促卵泡激素(FSH)、甲狀旁腺激素(PTH)、TSH、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)等多種指標(biāo)的檢測過程造成顯著干擾。尤其在免疫透射比濁法里,嗜異性抗體能夠促使偶聯(lián)抗體的膠乳顆粒聚集在一起,使得反應(yīng)體系的濁度異常增強(qiáng),進(jìn)而引發(fā)假陽性結(jié)果。


人抗動物抗體與嗜異性抗體在結(jié)構(gòu)和功能上存在一定的同源性,其產(chǎn)生大多與動物 Ig 治療經(jīng)歷或頻繁接觸動物有關(guān)。通常情況下,人在接觸動物 2 周左右便會產(chǎn)生抗體,且這些抗體在人體內(nèi)可存留長達(dá) 30 個月之久。人抗動物抗體對不同的免疫分析方法干擾機(jī)制各異。在雙位點(diǎn)免疫分析法場景下,人抗動物抗體能夠同時連接檢測抗體和捕獲抗體,形成異常的免疫復(fù)合物,從而對檢測結(jié)果造成正向干擾;然而,當(dāng)它分別與這兩個抗體單獨(dú)結(jié)合時,又會破壞正常的免疫反應(yīng)進(jìn)程,導(dǎo)致負(fù)向干擾。不僅如此,高濃度的人抗動物抗體還會對競爭法檢測產(chǎn)生干擾,影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。已有研究證實(shí),人抗動物抗體會干擾包括甲狀腺激素(TH)、心臟標(biāo)志物、PTH、風(fēng)疹病毒 IgM、性激素等多種物質(zhì)的檢測流程,為臨床診斷帶來諸多挑戰(zhàn)。


1、預(yù)防策略
當(dāng)使用動物來源的抗體為患者開展診療活動時,合理給予免疫抑制劑能夠在一定程度上阻礙人抗動物抗體的生成,進(jìn)而有效降低人抗動物抗體引發(fā)的檢測干擾。不過,需要注意的是,免疫抑制劑對于嗜異性抗體的抑制效果卻并不理想,所能發(fā)揮的作用微乎其微。


2、方法學(xué)改良
1)試劑籌備階段:
① 嘗試以羊抗體替換試劑盒中原有的鼠抗體,鑒于羊抗體與人抗動物抗體或嗜異性抗體的反應(yīng)特性不同,有望減少不必要的免疫反應(yīng)干擾;
② 采用不同種屬的分析用抗體,例如聯(lián)合運(yùn)用多克隆抗體(PcAb)和單克隆抗體(McAb),通過多樣化的抗體組合,降低免疫原性帶來的干擾風(fēng)險(xiǎn);
③ 運(yùn)用聚乙二醇(PEG)包被抗體,利用 PEG 的物理化學(xué)特性,在抗體表面形成一層 “保護(hù)屏障”,減少其免疫原性造成的不良干擾;
④ 選用 F(ab')2 片段取代完整的 Ig 或者借助酶處理 Ig 去除 Fc 段,其中兔 F(ab')2 片段是較為常用的選擇,以此規(guī)避 Fc 段引發(fā)的免疫反應(yīng);
⑤ 引入人源化嵌合抗體,憑借其與人體免疫系統(tǒng)的良好兼容性,降低免疫原性,或者采用重組單克隆 IgY 作為試劑抗體,從源頭上削減干擾因素。


2)標(biāo)本檢測時刻:
① 由于嗜異性抗體和人抗動物抗體都屬于大分子物質(zhì),借助超速離心技術(shù)(10000×g 離心 10 分鐘),能夠依據(jù)分子量差異將其部分分離出去,從而減少對檢測的干擾;
② 運(yùn)用 PEG6000 對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理,促使嗜異性抗體或人抗動物抗體沉淀析出,隨后通過離心去除沉淀,再對處理后的上清液進(jìn)行檢測,確保檢測準(zhǔn)確性;
③ 向標(biāo)本中添加過量的動物 Ig,利用抗原 - 抗體特異性結(jié)合原理,吸附嗜異性抗體或人抗動物抗體,凈化檢測樣本;
④ 采用 Protein A/G 等方法,借助其與抗體的親和作用,降低干擾物質(zhì)的影響;在雙位點(diǎn)檢測流程中,推薦采用兩步法檢測模式,并且在第 1 次洗板操作完成后加入阻斷劑。阻斷劑分為非特異性和特異性兩類,可添加至稀釋液或用于預(yù)處理標(biāo)本,通過與干擾物緊密結(jié)合,達(dá)到降低干擾的目的。


① 非特異性阻斷劑:
常用的非特異性阻斷劑是濃度為 1% 的正常動物血清,它能夠非特異性地結(jié)合部分干擾物質(zhì)。在商品化的非特異性阻斷劑中,MAK33、MAB33、poly MAB33 等較為常見。其中,MAK33 有其特殊的使用要求,需經(jīng)過 60℃的熱處理,并結(jié)合小牛 Ig 后,才能充分發(fā)揮阻斷干擾的作用。


② 特異性阻斷試劑:
特異性阻斷試劑主要靶向人 Ig,在商品化產(chǎn)品里,Ig 抑制劑、異嗜性抗體封閉劑、異嗜性抗體封閉管等是典型代表。Ig 抑制劑屬于混合鼠 McAb,其免疫原為人抗動物抗體和嗜異性抗體,與人抗動物抗體之間具有頗高的親和力(達(dá)到 109 L・mol⁻¹),因而可作為人抗動物抗體的特效阻斷劑。異嗜性抗體封閉劑本質(zhì)是鼠抗人 IgM 的 McAb,它降低干擾的效果與人和動物抗體之間的結(jié)合常數(shù)緊密相關(guān)(通常為 106 L・mol⁻¹)。Ig 抑制劑和異嗜性抗體封閉劑二者結(jié)合力較強(qiáng),在某些檢測項(xiàng)目中,它們的阻斷能力要優(yōu)于非特異性阻斷劑。然而,不得不承認(rèn)的是,即便如此,這兩類抗體也都無法做到徹底消除干擾,仍有一定的提升空間。


共識四:

應(yīng)降低自身抗體對免疫學(xué)檢測的干擾




自身抗體
自身抗體的靶抗原源自機(jī)體自身成分,其中大部分為 IgG 型。這類抗體主要針對自身抗原的免疫學(xué)檢測過程施展干擾 “魔力”。舉例來說,抗胰島素抗體能夠干擾胰島素的精準(zhǔn)檢測,抗 cTnI 抗體會對 cTnI 的檢測結(jié)果造成偏差,抗甲狀腺球蛋白抗體則會攪亂甲狀腺球蛋白的檢測流程。當(dāng)自身抗體與靶抗原相互結(jié)合后,會形成穩(wěn)定的復(fù)合物,這種復(fù)合物的存在往往會對靶抗原的測定結(jié)果帶來負(fù)向干擾,使得檢測值低于真實(shí)水平。


此外,還有一種特殊情況,巨分子 TSH 是由抗 TSH 自身 Ig 與 TSH 結(jié)合而成的免疫復(fù)合物,它的出現(xiàn)會造成 TSH 檢測結(jié)果呈現(xiàn)假性升高,誤導(dǎo)臨床判斷。與之類似的無活性大分子物質(zhì)還有巨泌乳素,它是抗泌乳素抗體和泌乳素緊密結(jié)合后形成的免疫復(fù)合物,會致使泌乳素檢測結(jié)果出現(xiàn)假性升高現(xiàn)象,進(jìn)而可能引發(fā)誤診為高泌乳素血癥的情況,給患者診療帶來不必要的困擾。


在檢測流程中,可向標(biāo)本內(nèi)添加 25% 的聚乙二醇 6000(PEG 6000),通過離心操作去除沉淀物質(zhì)后,采集上清液用于后續(xù)檢測步驟。除此之外,還能夠采用 pH 值為 3.0 的洗脫液來解離抗原抗體復(fù)合物;亦或運(yùn)用解離液(含 0.3% 的曲拉通 X - 100、1.5% 的 3 - [(3 - 膽酰胺丙基) 二甲基銨基] - 1 - 丙磺酸(CHAPS)以及 15% 的十二烷基硫酸鈉(SDS))對標(biāo)本中的免疫復(fù)合物進(jìn)行解離處理,隨后再開展測定工作;還可以將 100 μL 的標(biāo)本與 50 μL 的解離液充分混勻,置于 56 ℃的環(huán)境下處理 30 分鐘,以此降低自身抗體所帶來的干擾。

共識五:

應(yīng)降低補(bǔ)體對免疫學(xué)檢測的干擾




關(guān)于補(bǔ)體方面,急性炎癥、組織損傷以及風(fēng)濕免疫病等多種情況均會致使血清補(bǔ)體水平上升,而且酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)檢測系統(tǒng)中的酶結(jié)合物也有可能引發(fā)補(bǔ)體活化現(xiàn)象。此外,抗體結(jié)構(gòu)發(fā)生的改變會推動補(bǔ)體 1q 與免疫球蛋白 Fc 片段相結(jié)合,進(jìn)而產(chǎn)生假陽性的檢測結(jié)果。與此同時,活化后的補(bǔ)體能夠與固相抗體相結(jié)合,抑制抗體和抗原之間的特異性反應(yīng),最終導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性的檢測結(jié)果。


在對檢測標(biāo)本進(jìn)行處理時,有多種方式可以滅活補(bǔ)體,從而降低其對檢測結(jié)果的影響。一種方法是將血清置于 56℃的環(huán)境下加熱 30 分鐘,以此實(shí)現(xiàn)補(bǔ)體系統(tǒng)的滅活;另一種可行的途徑是使用乙二胺四乙酸對標(biāo)本進(jìn)行稀釋,當(dāng)乙二胺四乙酸的終濃度達(dá)到 10 至 40 mmol・L-1 時,便能有效地滅活補(bǔ)體。此外,像紫外線照射以及機(jī)械振蕩等其他手段,同樣能夠達(dá)成補(bǔ)體滅活的目的,進(jìn)而為檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性提供保障。

共識六:

應(yīng)采取相應(yīng)措施準(zhǔn)確測定激素




關(guān)于激素結(jié)合蛋白:激素結(jié)合蛋白在機(jī)體內(nèi)扮演著運(yùn)輸激素的關(guān)鍵角色,作為載體蛋白,它能夠與激素緊密結(jié)合,而這種結(jié)合作用會直接引發(fā)標(biāo)本中待測物濃度的改變,進(jìn)而干擾檢測結(jié)果。例如,性激素結(jié)合球蛋白具有與睪酮相結(jié)合的能力,二者結(jié)合后會使游離睪酮的濃度降低,在檢測睪酮含量時,這種結(jié)合現(xiàn)象就會對檢測結(jié)果產(chǎn)生負(fù)向干擾。在甲狀腺激素方面,超過 99% 的三碘甲狀原氨酸(T3)以及甲狀腺素(T4)會與甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)相結(jié)合,使得它們處于游離狀態(tài)的成分極低,因此,TBG 濃度的任何波動都可能對甲狀腺激素(TH)的檢測結(jié)果產(chǎn)生顯著影響。對于類固醇激素而言,其會與性激素結(jié)合球蛋白、皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白發(fā)生結(jié)合作用。而生長激素結(jié)合蛋白能夠與人體中大部分的生長激素相結(jié)合,這樣一來,就會阻礙生長激素與檢測抗體的正常結(jié)合,最終導(dǎo)致生長激素的檢測結(jié)果出現(xiàn)偏低的情況。


在檢測標(biāo)本的過程中,為了更準(zhǔn)確地獲取檢測結(jié)果,可采取多種方法來避免激素與蛋白結(jié)合對檢測結(jié)果的影響。一方面,可以通過使蛋白變性或者加入阻斷劑的方式,來抑制激素與蛋白之間的結(jié)合,從而使檢測能夠更接近真實(shí)的激素水平 。另一方面,在試劑研制階段,建議針對結(jié)合型激素和游離型激素分別設(shè)計(jì)不同的抗體結(jié)合位點(diǎn),進(jìn)而對二者分別進(jìn)行測定,這樣能夠?yàn)榕R床診斷提供更為豐富和準(zhǔn)確的檢測信息。除此之外,還可運(yùn)用一些其他措施,例如改變 pH 值、使用化學(xué)試劑使復(fù)合物解離等,但在實(shí)施這些措施時,必須要確保其不會對待測物的結(jié)構(gòu)或性質(zhì)造成不可逆的改變,以保證檢測結(jié)果的可靠性和有效性 。

共識七:

應(yīng)采取有效措施降低脂血對免疫學(xué)檢測的影響




脂血是臨床檢驗(yàn)中常見的干擾因素之一。高脂飲食、機(jī)體脂代謝紊亂以及輸注脂肪乳等情況,均有可能引發(fā)高脂血癥,進(jìn)而導(dǎo)致血液中血脂濃度出現(xiàn)異常增高的現(xiàn)象 。脂血的主要成分是乳糜微粒和極低密度脂蛋白,其中的乳糜成分會致使反應(yīng)體系的濁度明顯增高,這不僅會對檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾,還會使儀器的吸樣系統(tǒng)出現(xiàn)誤差,進(jìn)而影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。在臨床實(shí)踐中,大多實(shí)驗(yàn)室會依據(jù)三酰甘油(triglyceride,TG)的濃度來判斷檢測結(jié)果的可靠性。相關(guān)研究表明,輕度脂血會對時間分辨熒光分析法測定游離雌三醇的結(jié)果產(chǎn)生顯著的正干擾,而中重度脂血則會對中高水平的游離雌三醇測定產(chǎn)生明顯的負(fù)干擾。


其一,采血環(huán)節(jié)需確?崭?fàn)顟B(tài),以此減少飲食因素對檢測結(jié)果的潛在干擾。
其二,針對常規(guī)離心后的標(biāo)本,應(yīng)加蓋妥善密封,隨后實(shí)施真空超速離心或者高速離心操作,最終對下層清液進(jìn)行檢測,通過這種方式可有效分離出較為純凈的檢測樣本,提高檢測的準(zhǔn)確性。
其三,可運(yùn)用 PEG 6000 對脂血標(biāo)本予以預(yù)處理,在此過程中,含載脂蛋白 B 的脂蛋白將會沉淀,除高密度脂蛋白外,絕大部分脂質(zhì)會隨之沉淀,進(jìn)而降低脂質(zhì)對檢測的影響。
其四,還能夠采取超濾、血清稀釋、磷鎢酸 - 鎂法、乙醚提取以及使用脂質(zhì)清除劑(例如 LipoClear)等一系列措施來處理高脂血標(biāo)本,這些方法能夠有效減少乳糜微粒對檢測結(jié)果的不良影響,使檢測結(jié)果更加可靠。


共識八:

應(yīng)采取有效措施降低黃疸對免疫學(xué)檢測的影響




黃疸標(biāo)本在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)中較為常見。肝膽疾病以及自身免疫性溶血等情況可能致使膽紅素水平上升,無論是未結(jié)合膽紅素還是結(jié)合膽紅素,其濃度的異常升高均有可能引發(fā)假陰性的檢測結(jié)果。在免疫透射比濁法檢測體系中,膽紅素自身具有的本底吸光度會對檢測產(chǎn)生較大程度的干擾。由于膽紅素具有不穩(wěn)定性,可能導(dǎo)致吸收曲線出現(xiàn)漂移現(xiàn)象,所以在這種情況下,即便采用雙波長分析方法,有時也難以理想地消除本底干擾。相關(guān)研究顯示,在運(yùn)用免疫散射比濁法或者透射比濁法測定尿白蛋白時,膽紅素可能會致使檢測結(jié)果出現(xiàn)假性升高的情況,這無疑會給臨床診斷帶來一定的誤導(dǎo)。


在應(yīng)對檢測過程中黃疸對結(jié)果的干擾時,可采取以下幾種措施:
首先,選取正常體檢者的血清作為稀釋液,對待測標(biāo)本實(shí)施倍比稀釋,通過這樣的方式精準(zhǔn)確定最為合適的稀釋倍數(shù),從而有效降低黃疸因素對檢測結(jié)果的不良影響,提升檢測的準(zhǔn)確性與可靠性。
其次,合理設(shè)置副波長,例如將其設(shè)定為 540nm,以此來減少黃疸標(biāo)本中膽紅素等物質(zhì)對檢測信號的干擾,優(yōu)化檢測的精度和穩(wěn)定性。
再者,還可以考慮添加膽紅素氧化酶,通過酶的作用使膽紅素發(fā)生轉(zhuǎn)化,進(jìn)而減輕膽紅素所帶來的干擾,確保檢測結(jié)果能夠更真實(shí)地反映標(biāo)本的實(shí)際情況。


共識九:

可選擇特異性強(qiáng)的抗體,采用凝膠色譜層析法從標(biāo)本中提取待測物后,再進(jìn)行檢測,以降低交叉反應(yīng)物質(zhì)對免疫學(xué)檢測的干擾




在免疫檢測領(lǐng)域中,交叉反應(yīng)物質(zhì)是一個不容忽視的因素,它能夠引發(fā)免疫交叉反應(yīng)。這是因?yàn)榻徊娣磻?yīng)物質(zhì)與待測物在結(jié)構(gòu)上具有相似性,或者擁有高度同源的抗原表位。例如,當(dāng)待測標(biāo)本中存在類地高辛物質(zhì)時,就會對單克隆抗體針對抗原的檢測產(chǎn)生正向干擾。從原理上講,交叉反應(yīng)物在檢測過程中相當(dāng)于增加了待測物的實(shí)際濃度,這就容易導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性的情況;然而,另一方面,相較于待測物,交叉反應(yīng)物在與抗體結(jié)合后的解離速度更快,這種特性又可能致使檢測結(jié)果呈現(xiàn)假陰性。以人絨毛膜促性腺激素(HCG)為例,它與眾多物質(zhì)存在同源結(jié)構(gòu)。具體而言,HCG 的 α 亞基與促甲狀腺激素(TSH)、促黃體生成素(luteinizing mone,LH)以及卵泡刺激素(FSH)的 α 亞基具有高度的同源性,這也就意味著它們之間存在交叉抗原性;同時,HCG 的 β 亞基與 LH、絲氨酸蛋白酶以及轉(zhuǎn)化生長因子的 β 亞基也具有較高的同源性,這些同源結(jié)構(gòu)會引發(fā)交叉反應(yīng),最終導(dǎo)致 HCG 的免疫分析結(jié)果出現(xiàn)假性偏高的現(xiàn)象,給臨床診斷帶來潛在的誤導(dǎo)風(fēng)險(xiǎn)。

共識十:

可用卵白蛋白和Cu2+將溶菌酶封閉,阻斷其橋連作用,從而降低溶菌酶對免疫學(xué)檢測的干擾




溶菌酶

溶菌酶主要分布在淚液、唾液、血漿、尿液、乳汁等體液中,與較低等電點(diǎn)的蛋白更易結(jié)合,在雙抗體夾心法測定系統(tǒng)中,溶菌酶可通過橋連酶標(biāo)IgG和包被IgG正向干擾檢測結(jié)果。

共識十一:

可用0.9% NaCl溶液稀釋標(biāo)本后再測,以降低M蛋白對免疫學(xué)檢測的干擾




M蛋白

M蛋白是由漿細(xì)胞或B淋巴細(xì)胞單克隆惡性增殖產(chǎn)生的一種異常Ig,主要干擾免疫比濁法的檢測結(jié)果。免疫透射比濁法較免疫散射比濁法更易受M蛋白的干擾,其可能原因是免疫散射比濁法在檢測前對標(biāo)本進(jìn)行了預(yù)稀釋,從而降低了M蛋白的干擾。

共識十二:

應(yīng)采取有效措施降低生物素對免疫學(xué)檢測的干擾




外源性干擾因素及處理措施


在免疫檢測的實(shí)踐過程中,外源性干擾因素常常會對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性造成顯著的不良影響。這些干擾因素的產(chǎn)生,主要源于免疫檢測反應(yīng)中所涉及的標(biāo)記物,以及在標(biāo)本采集、處理與保存等環(huán)節(jié)中存在的不當(dāng)操作,諸如添加抗凝劑時的不合理方式等,進(jìn)而導(dǎo)致檢測平臺的穩(wěn)定性受到破壞,使得標(biāo)本出現(xiàn)被污染的情況,甚至引發(fā)溶血和纖維蛋白析出等現(xiàn)象。


生物素作為一種水溶性的 B 族維生素,在免疫檢測的標(biāo)記反應(yīng)里,當(dāng)它與抗原或抗體進(jìn)行結(jié)合時,從活性層面來看,一般不會對后者的原有活性產(chǎn)生明顯的改變。然而,從空間結(jié)構(gòu)的角度分析,生物素與被標(biāo)記物之間極有可能存在空間位阻效應(yīng),而這種空間位阻的存在,恰恰會對免疫學(xué)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性形成干擾。


當(dāng)受檢者攝入了過量的外源性生物素時,這種情況將會對以生物素 - 鏈霉親和素作為固相分離系統(tǒng)的免疫學(xué)檢測構(gòu)成嚴(yán)重的干擾。這里所提到的外源性生物素,具體是指人體在攝入生物素之后,于血液中存在的游離生物素以及其代謝所產(chǎn)生的相關(guān)產(chǎn)物。


值得注意的是,外源性生物素對檢測結(jié)果的干擾具有復(fù)雜的特性,它既能夠?qū)е鲁霈F(xiàn)假陽性的干擾結(jié)果,也可能引發(fā)假陰性的干擾情形。例如,在運(yùn)用夾心法對促甲狀腺激素(TSH)進(jìn)行檢測時,一旦血清中游離生物素的含量超出正常水平,過量的游離生物素便會迅速占據(jù)鏈霉親和素磁珠的結(jié)合位點(diǎn)。如此一來,那些原本應(yīng)當(dāng)與捕獲抗體連接的生物素就無法順利地與鏈霉親和素磁珠相結(jié)合,這必然會使得最終的檢測結(jié)果低于實(shí)際應(yīng)有的水平,從而出現(xiàn)假陰性的情況。


而在競爭法的檢測模式下,內(nèi)源性分析物與標(biāo)記的(信號)分析物會針對單個生物素化的抗體結(jié)合位點(diǎn)展開激烈的競爭。當(dāng)生物素化的抗體成功結(jié)合到鏈霉親和素包被的固相載體上之后,其發(fā)光信號會隨著分析物濃度的逐漸增加而呈現(xiàn)出減少的趨勢。倘若此時存在著較高濃度的生物素,那么過量的生物素就會搶先與固相載體相結(jié)合,這樣就會有效地阻止內(nèi)源性抗體與標(biāo)記分析物之間的正常結(jié)合。與此同時,那些未能成功結(jié)合的抗體在后續(xù)的沖洗步驟中會被徹底清除掉,這就會導(dǎo)致發(fā)光信號出現(xiàn)假性的減少,最終使得檢測結(jié)果呈現(xiàn)出假陽性的狀態(tài)。


以三碘甲狀原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、游離三碘甲狀原氨酸(FT3)以及游離甲狀腺素(FT4)的競爭法檢測為例,生物素的存在會致使這些檢測項(xiàng)目的結(jié)果出現(xiàn)偏高的現(xiàn)象,也就是產(chǎn)生了假陽性的結(jié)果。


綜上所述,外源性生物素的濃度越高,并且標(biāo)本的加樣量越大,那么它對檢測結(jié)果所造成的干擾程度也就會越發(fā)嚴(yán)重。但需要明確的是,這種由外源性生物素所引發(fā)的干擾情況,與待測物本身的實(shí)際水平并無直接的關(guān)聯(lián)。相反,試劑中所包含的生物素濃度越高,以及反應(yīng)體系中鏈霉親和素磁微粒的加樣量越大,那么該檢測體系對抗外源性生物素干擾的能力就會越強(qiáng),從而在一定程度上能夠降低外源性生物素對檢測結(jié)果的不良影響,保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。


  1. 試劑準(zhǔn)備階段:

    • 對于試劑生產(chǎn)商而言,一種可行的策略是開發(fā)并推出商品化的生物素中和試劑,以此來有效對抗外源性生物素的干擾。另外,還可以考慮適當(dāng)提高試劑中的生物素含量,或者增加鏈霉親和素磁微粒在試劑中的濃度,通過這種方式來增強(qiáng)檢測體系對外源性生物素干擾的抵抗能力,從而保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

    • 在技術(shù)研發(fā)方面,應(yīng)積極推動新技術(shù)的探索與應(yīng)用。例如,研發(fā)能夠特異性地與游離生物素相結(jié)合的抗生物素抗體,而且這種抗體不會與標(biāo)記在抗體表面的生物素發(fā)生結(jié)合反應(yīng),如此一來,便可將其作為一種抗干擾成分添加到免疫檢測的反應(yīng)體系之中,進(jìn)而顯著減少外源性生物素對檢測結(jié)果的干擾。

    • 此外,還可以嘗試通過預(yù)先制備生物素試劑 - 鏈霉親和素磁微粒,并運(yùn)用分子阱技術(shù)來降低生物素可能產(chǎn)生的干擾,為免疫檢測提供更為穩(wěn)定可靠的實(shí)驗(yàn)條件。

  2. 檢測標(biāo)本過程中:

    • 從標(biāo)本采集的時間節(jié)點(diǎn)來看,建議在患者尚未使用生物素之前進(jìn)行標(biāo)本采集;倘若患者已經(jīng)使用了生物素,則應(yīng)當(dāng)在其停用生物素 2 - 3 天之后再采集標(biāo)本,這樣可以有效降低生物素在體內(nèi)的殘留量,從而減少外源性生物素對檢測結(jié)果的影響。

    • 在檢測方法的選擇上,當(dāng)發(fā)現(xiàn)可能存在生物素干擾的情況下,建議采用非生物素 - 鏈霉親和素免疫檢測法對標(biāo)本進(jìn)行再次檢測,以此來驗(yàn)證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,避免因生物素干擾而導(dǎo)致的誤診。

    • 還可以利用試劑盒中鏈霉親和素包被的磁珠與含有生物素的血清共同孵育 1 小時,然后通過離心操作去除與磁珠結(jié)合的生物素,最后對上清液進(jìn)行重新檢測,這種方法能夠在一定程度上降低生物素的干擾,提高檢測結(jié)果的可靠性。

    • 此外,在實(shí)際操作中,應(yīng)當(dāng)依據(jù)抗體分子所攜帶的可標(biāo)記基團(tuán)的具體種類(如氨基、醛基或巰基)以及分子的酸堿性等特性,來謹(jǐn)慎選擇相應(yīng)的活化生物素以及適宜的反應(yīng)條件,確保生物素與被標(biāo)記物之間能夠?qū)崿F(xiàn)更為精準(zhǔn)有效的結(jié)合,減少因結(jié)合不當(dāng)而產(chǎn)生的空間位阻,進(jìn)而降低對免疫學(xué)檢測結(jié)果的干擾。

    • 同時,為了進(jìn)一步減少空間位阻對免疫學(xué)檢測的不良影響,可以考慮在生物素與被標(biāo)記物之間引入交聯(lián)臂樣結(jié)構(gòu),通過這種方式來優(yōu)化生物素與被標(biāo)記物之間的空間關(guān)系,提高檢測的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。


共識十三:

應(yīng)及時識別和糾正ALP對免疫學(xué)檢測的干擾,以提高檢測結(jié)果的可信度





堿性磷酸酶(ALP)干擾情況闡述


堿性磷酸酶(ALP)作為免疫學(xué)檢測中較為常見的一種標(biāo)記酶,其在檢測過程中所引發(fā)的干擾問題主要與交叉反應(yīng)密切相關(guān)。在免疫分析的實(shí)際操作中,由于抗體自身特異性存在一定的局限性,這就可能導(dǎo)致 ALP 與其他具有相似結(jié)構(gòu)的物質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng),進(jìn)而產(chǎn)生假陽性的檢測結(jié)果。


這種交叉反應(yīng)的發(fā)生幾率可能會受到某些藥物或激素的影響,例如潑尼松、螺內(nèi)酯以及氟氫可的松等藥物的存在,可能會增加 ALP 與其他物質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性。此外,像卡馬西平等藥物在體內(nèi)代謝后所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,也可能會與 ALP 發(fā)生交叉反應(yīng),從而對免疫學(xué)檢測結(jié)果造成干擾。


在腎衰竭等特定的疾病狀態(tài)下,患者體內(nèi)可能會積累一些特定的代謝產(chǎn)物,而這些代謝產(chǎn)物同樣有可能與 ALP 發(fā)生交叉反應(yīng),進(jìn)而影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。


總體而言,ALP 在免疫檢測中所造成的相關(guān)干擾,其主要原因可能是由于抗體的非特異性結(jié)合,或者是標(biāo)本中存在某些與 ALP 結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì),這些因素共同作用,導(dǎo)致了檢測結(jié)果的偏差,因此在免疫檢測過程中,需要充分考慮到 ALP 可能帶來的干擾,并采取相應(yīng)的措施加以避免或糾正。


正確評估患者狀態(tài),盡量在非疾病活動期或用藥期間采集血液標(biāo)本,減少疾病代謝產(chǎn)物或藥物與ALP發(fā)生交叉反應(yīng),影響檢測結(jié)果。采用合適的方法對抗原或抗體進(jìn)行ALP標(biāo)記;同時,提供合適的pH環(huán)境,保證ALP活性,以便其在最適條件發(fā)揮較強(qiáng)的催化功能。

共識十四:

應(yīng)采取有效措施來降低吖啶酯對免疫學(xué)檢測的干擾




吖啶酯


吖啶酯作為一類重要的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)分析,包括競爭法和夾心法免疫分析。吖啶酯以其高靈敏度和快速的光發(fā)射特性,以及高量子產(chǎn)率被廣泛用于檢測低豐度的生物標(biāo)記物。吖啶酯的化學(xué)發(fā)光穩(wěn)定性是一個關(guān)鍵問題,其一些衍生物在特定條件下不夠穩(wěn)定,發(fā)光強(qiáng)度易受pH值的影響,這可能會影響免疫學(xué)檢測的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中,存在不導(dǎo)致發(fā)光的競爭性暗反應(yīng)路徑,這些路徑在熱力學(xué)上可能更適用,選擇適當(dāng)?shù)臏y量條件對于消除相關(guān)反應(yīng)對化學(xué)發(fā)光效率的影響至關(guān)重要。

共識十五:

可使用不依賴于釕標(biāo)記的檢測平臺或采用PEG6000沉淀降低三聯(lián)吡啶釕對免疫學(xué)檢測的干擾




三聯(lián)吡啶釕

釕是一種廣泛應(yīng)用于電化學(xué)領(lǐng)域的金屬標(biāo)記物,電化學(xué)發(fā)光免疫分析利用釕的化學(xué)性質(zhì),通過施加電壓激發(fā)三聯(lián)吡啶釕復(fù)合物,產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光反應(yīng),由此產(chǎn)生的光量與標(biāo)本中的待測物濃度成反比。然而,使用三聯(lián)吡啶釕也可能引起一些問題,尤其是當(dāng)患者體內(nèi)存在抗釕抗體時,可能導(dǎo)致假陽性或假陰性結(jié)果。如,在甲狀腺功能檢測中,抗釕抗體可能與三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記的TH抗體或釕交聯(lián)復(fù)合物發(fā)生反應(yīng),導(dǎo)致信號降低,引起FT4或FT3濃度假性升高,最終誤診為甲狀腺功能亢進(jìn)。

共識十六:

應(yīng)采取有效措施降低溶血對免疫學(xué)檢測的干擾




血現(xiàn)象的產(chǎn)生,除了源于體內(nèi)自身的溶血機(jī)制外,還可能由多種外在因素引發(fā)。例如,在采樣過程中若操作不當(dāng),使用了低滲溶液,對樣本進(jìn)行機(jī)械性強(qiáng)力振蕩,或是使樣本經(jīng)歷突然的冷凍(溫度處于 -20 至 -25℃之間)以及隨后的解凍過程等,均有可能導(dǎo)致溶血情況的出現(xiàn)。


當(dāng)溶血發(fā)生時,血紅蛋白(Hb)從紅細(xì)胞中釋放出來,這一過程會對免疫學(xué)檢測結(jié)果造成或正或負(fù)的干擾。具體而言,溶血會致使采用電化學(xué)發(fā)光法檢測肌紅蛋白(Myo)和心肌肌鈣蛋白 T(cTnT)時,所得結(jié)果呈現(xiàn)偏低的趨勢。即便溶血程度較輕,其對 Myo 和 cTnT 的檢測結(jié)果也會產(chǎn)生較為顯著的影響。


Hb 中的亞鐵血紅素具備類似過氧化物酶的活性,這種特性會在 ELISA 檢測系統(tǒng)中引發(fā)非特異性顯色反應(yīng),進(jìn)而干擾檢測結(jié)果。比如,在運(yùn)用一步法測定乙型肝炎表面抗原時,溶血就會產(chǎn)生正干擾作用,并且溶血程度越嚴(yán)重,這種正干擾的效果就越顯著。


對于人類免疫缺陷病毒抗體的檢測,溶血會導(dǎo)致 ELISA 檢測結(jié)果出現(xiàn)假性偏高的情況,然而化學(xué)發(fā)光法受溶血的影響相對較小。因此,化學(xué)發(fā)光法在人類免疫缺陷病毒抗體的篩查工作中具有優(yōu)勢,可作為主要的檢測方式。


在胰島素和 C 肽的定量化學(xué)發(fā)光免疫法測定中,溶血會使得檢測結(jié)果偏低。由于紅細(xì)胞中的葉酸水平大約是血清中的 16.7 倍,所以溶血會造成化學(xué)發(fā)光法檢測葉酸的結(jié)果偏高。此外,溶血所釋放出的 Hb 還可能與鐵蛋白抗體發(fā)生非特異性反應(yīng),最終導(dǎo)致化學(xué)發(fā)光免疫分析定量檢測鐵蛋白的結(jié)果偏高。


綜上所述,溶血作為一種常見的樣本異常情況,在免疫學(xué)檢測中可能會對多種檢測項(xiàng)目的結(jié)果產(chǎn)生顯著干擾,因此在檢測過程中應(yīng)盡量避免溶血現(xiàn)象的發(fā)生,同時對于溶血樣本的檢測結(jié)果應(yīng)進(jìn)行謹(jǐn)慎的分析和判斷,必要時采取相應(yīng)的糾正措施以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。


應(yīng)規(guī)范標(biāo)本采集、運(yùn)輸、處理流程,必要時重新采集標(biāo)本復(fù)查。另外,在報(bào)告檢測結(jié)果時要注意溶血的影響,并在數(shù)據(jù)中標(biāo)注。

共識十七:

應(yīng)采取有效措施降低纖維蛋白對免疫學(xué)檢測的干擾




纖維蛋白


在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液標(biāo)本會在采集2 h后完全凝固。在臨床檢驗(yàn)工作中,對未充分凝固的血液進(jìn)行離心會導(dǎo)致纖維蛋白原殘留,形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果。纖維蛋白會造成TH假性偏高,對固相雙位點(diǎn)化學(xué)發(fā)光法測定HCG產(chǎn)生負(fù)干擾。


·促凝劑及采血管的選擇:


在采集血液標(biāo)本的過程中,向其中添加適量的促凝劑,或者直接選用配備有分離膠的專用采血管。


·凝血時間的把控

 

務(wù)必等待血液標(biāo)本充分凝固后,再進(jìn)行離心操作。對于那些正在接受抗凝治療的患者而言,其血液的凝集過程會有所延遲,因此需要給予更長的時間以確保血液完全凝固。


·低溫過夜處理

 

將血液標(biāo)本置于 4℃的環(huán)境中過夜保存后,再對其進(jìn)行離心操作。


·肝素治療患者的標(biāo)本采集


針對正在接受肝素治療的患者,由于其血液標(biāo)本存在凝固不全的可能性,所以應(yīng)當(dāng)盡量在肝素治療開始前采集血液標(biāo)本。這


·離心條件的優(yōu)化

  

把血液標(biāo)本小心地轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi),然后將離心管放置在離心機(jī)中,設(shè)置離心速度為≥10,000×g,并持續(xù)離心 10 分鐘。

共識十八:

應(yīng)規(guī)范標(biāo)本前處理流程,保證樣品合格,降低對免疫學(xué)檢測的干擾




細(xì)菌污染


容器被污染、標(biāo)本保存不當(dāng)均可導(dǎo)致標(biāo)本發(fā)生細(xì)菌污染。細(xì)菌攜帶的辣根過氧化物酶會引起非特異性顯色,尤其是以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA檢測系統(tǒng),檢測結(jié)果會受到較大影響。



  1. 標(biāo)本采集與保存的基本要求:

    • 務(wù)必使用潔凈無污染的容器來采集標(biāo)本,確保所采集的標(biāo)本保持新鮮狀態(tài),并且在采集后應(yīng)盡快安排檢測工作,以最大程度地減少標(biāo)本因放置時間過長而可能發(fā)生的成分變化和潛在污染,從而避免對檢測結(jié)果產(chǎn)生不良影響。

  2. 短期與長期保存的不同策略:

    • 倘若預(yù)計(jì)在 5 天內(nèi)進(jìn)行檢測,那么可以將標(biāo)本放置在 4℃的環(huán)境中進(jìn)行短暫冷藏保存。這種冷藏條件能夠在一定時間內(nèi)延緩標(biāo)本中各種成分的代謝和分解過程,維持其相對穩(wěn)定的狀態(tài),同時又不會對標(biāo)本的性質(zhì)造成顯著改變,從而保證檢測結(jié)果的有效性。

    • 然而,如果檢測時間安排在 1 周之后,此時則需要將標(biāo)本進(jìn)行凍存處理。凍存能夠極大程度地抑制標(biāo)本內(nèi)的生化反應(yīng)和微生物生長,長時間地保存標(biāo)本的原始特性,使得在后續(xù)進(jìn)行檢測時,標(biāo)本依然能夠準(zhǔn)確反映出其在采集時的真實(shí)狀態(tài),確保檢測結(jié)果的可信度和參考價值。



共識十九:應(yīng)規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作流程




某些外源性雌激素類、孕激素類,或具有雄激素效應(yīng)的物質(zhì),會通過污染加樣吸頭或反應(yīng)杯導(dǎo)致性激素和鱗狀細(xì)胞癌抗原檢測假陽性。


  1. 個人防護(hù)措施
    實(shí)驗(yàn)操作時必須佩帶手套,必要時戴口罩,避免皮膚直接接觸加樣吸頭或反應(yīng)杯。


  2. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境清潔維護(hù)
    保持實(shí)驗(yàn)室清潔,避免加樣吸頭或反應(yīng)杯受灰塵污染

  3. 意外情況的應(yīng)急處理
    如質(zhì)控品等意外濺撒,應(yīng)及時清潔通風(fēng)。

總結(jié)




目前,有較多研究已對免疫學(xué)檢測中存在的干擾進(jìn)行了探索,并取得了一定的成果。需要強(qiáng)調(diào)的是,干擾是絕對存在的。檢驗(yàn)科的室內(nèi)質(zhì)控存在局限性,檢驗(yàn)工作者需綜合考慮檢驗(yàn)環(huán)境和患者臨床表征,及時與臨床溝通,優(yōu)化“開具醫(yī)囑-采血-標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)-標(biāo)本接收-上機(jī)檢測-結(jié)果審核-結(jié)果報(bào)告”全流程,檢驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)充分了解可能影響免疫學(xué)檢測的各種干擾因素,采取有效的控制措施和解決策略,為臨床提供精準(zhǔn)、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。

作者:北京醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會 上海市醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會

引用本文:北京醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會,上海市醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會. 免疫學(xué)檢測的干擾因素和處理策略專家共識[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2024,39(12):1131-1139.

執(zhí)筆:崔麗艷,王培昌,王學(xué)鋒,曹永彤,王學(xué)晶

評審專家(按姓氏筆劃):馬麗娟,王永志,王佳誼,王雅杰,王輝,王蕾,厲倩,盧仁泉,劉向祎,劉慶中,劉維薇,閆存玲,閆偉,安成,李冬,李永哲,李傳保,李伯安,李金明,李海霞,李敏,李綿洋,李琦,楊虹,楊翠霞,楊曦明,吳文娟,吳俊,吳蓉,邱玲,余方

全國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)企業(yè)管理協(xié)會醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)產(chǎn)業(yè)分會 全國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)企業(yè)管理協(xié)會實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會
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