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背景：血小板是一種小血細(xì)胞，在止血、炎癥和免疫中發(fā)揮著重要作用。全面分析血小板表型和功能的能力對于心血管研究和血小板疾病的臨床診斷都非常重要。流式細(xì)胞術(shù)允許在生理?xiàng)l件下使用少量全血對血小板進(jìn)行研究。流式細(xì)胞儀技術(shù)的最新進(jìn)展，如質(zhì)譜細(xì)胞儀和光譜細(xì)胞儀，可同時(shí)分析單個(gè)血小板的十幾個(gè)參數(shù)，提供豐富的多變量信息。然而，已發(fā)表的方案很少充分利用這些多參數(shù)技術(shù)。

Spurgeon BEJ等人在Cytometry A上介紹了一種新型的 16 色流式細(xì)胞儀方案，用于對人類血小板進(jìn)行多參數(shù)表型分析。該方案可靈敏識別與止血、炎癥和免疫相關(guān)的各種血小板亞群。它在以前的血小板流式細(xì)胞儀方案的基礎(chǔ)上，加入了磷脂酰絲氨酸、C3b、CD32 和 TLR9 等新型標(biāo)記物以及已有的活化標(biāo)記物。

作者優(yōu)化了一套方案，可對檸檬酸化全血中的新鮮血小板進(jìn)行染色，然后在 2 小時(shí)內(nèi)進(jìn)行裂解/固定和采集。經(jīng)過廣泛驗(yàn)證，確保了技術(shù)可靠性。該方案包含以下內(nèi)容：

•磷脂酰絲氨酸，用于識別促凝血小板

•CD62P、PAC-1、CD63、CD107a、CD154 和 TLT-1 等活化標(biāo)志物

•C3b、CD32 和 TLR9 等新標(biāo)記物

•組成型受體，如 CD29、CD31、CD36 和 GPVI

FAUST自動設(shè)門顯示了四個(gè)主要亞群：促凝、促聚集、促炎和靜息血小板。雙變量圖和直方圖總結(jié)了不同亞群的標(biāo)記物特征。樣本在 24 小時(shí)后會出現(xiàn)一些熒光衰減。

總之，多參數(shù)流式方案可鑒定臨床相關(guān)的血小板表型，開放式通道設(shè)計(jì)可根據(jù)特定研究需求進(jìn)行定制。在經(jīng)過優(yōu)化和驗(yàn)證的程序之后，可廣泛用于心血管研究和臨床診斷中的血小板生物學(xué)研究。新型標(biāo)記物的創(chuàng)新應(yīng)用和自動化分析為利用新興的細(xì)胞測量技術(shù)提供了一個(gè)范例。

參考文獻(xiàn)：

Spurgeon BEJ, Frelinger AL 3rd. OMIP-097: High-parameter phenotyping of human platelets by spectral flow cytometry [published online ahead of print, 2023 Oct 3]. Cytometry A. 2023;10.1002/cyto.a.24797. doi:10.1002/cyto.a.24797