
之前大家所了解到的新冠病毒核酸檢測(cè)時(shí)間為6-8小時(shí),但近日,隨著檢測(cè)量的巨增,很多檢測(cè)報(bào)告可能會(huì)出現(xiàn)延遲,也請(qǐng)廣大市民耐心等待,一線的檢驗(yàn)人員都在努力地為每一份報(bào)告結(jié)果而日夜奮戰(zhàn)著!
今天,我們就來(lái)向大家介紹下,一份從您口腔或鼻腔采集的檢測(cè)標(biāo)本究竟會(huì)經(jīng)歷哪些處理環(huán)節(jié),我們又該如何選擇常規(guī)檢測(cè)和快速檢測(cè)呢?
核酸檢測(cè)指利用熒光PCR技術(shù)檢測(cè)生物體核酸(DNA或RNA)的過(guò)程。(PCR是英文Polymerase chain reaction的縮寫(xiě),中文名稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))。PCR能夠利用特殊的酶在生物體外進(jìn)行DNA片段復(fù)制,將特定的DNA片段擴(kuò)增放大,從而達(dá)到能夠檢測(cè)的目的。
新冠病毒的核酸物質(zhì)是RNA,因此檢測(cè)過(guò)程中首先要把RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄變成DNA后才能進(jìn)行檢測(cè)。隨后PCR過(guò)程由變性、退火、延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟進(jìn)行。
➊ 變性:DNA雙鏈(模板)打開(kāi),變成單鏈DNA;
➋ 退火:特定引物(DNA小片段)與單鏈DNA互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合;
➌ 延伸:?jiǎn)捂淒NA合成雙鏈DNA(半保留復(fù)制,在復(fù)制產(chǎn)生的兩條子代DNA雙鏈鏈中包含一條來(lái)自親代DNA的單鏈和一條新合成的DNA單鏈)。
隨后,重復(fù)循環(huán)以上三個(gè)步驟,獲得更多的半保留復(fù)制鏈,成為下個(gè)循環(huán)的模板,從而使原始微量DNA模板特定區(qū)域得到指數(shù)級(jí)增加,放大幾百萬(wàn)倍。每完成1個(gè)循環(huán)需要1-2分鐘,整個(gè)反應(yīng)時(shí)間2-3小時(shí)。
PCR反應(yīng)過(guò)程示意圖
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),常規(guī)PCR檢測(cè)在樣本采集后需要進(jìn)行核酸純化(通常需要30-60分鐘左右)再進(jìn)行后續(xù)PCR反應(yīng)。
通常一塊反應(yīng)板中可夠容納96個(gè)獨(dú)立的反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行,(最多檢測(cè)91個(gè)樣本,外加5個(gè)質(zhì)控樣本),PCR反應(yīng)時(shí)間需要2小時(shí)左右。
快速檢測(cè)在樣本采集后直接放入裂解液中釋放核酸,通常無(wú)須進(jìn)行核酸純化可以直接進(jìn)行PCR反應(yīng),使用快檢專(zhuān)用儀器,檢測(cè)所需時(shí)間在0.5-1.5小時(shí)左右。
快速檢測(cè)流程簡(jiǎn)單,時(shí)間短,
那為何不全部選擇快速檢測(cè)呢?
快速檢測(cè)一般通量較。2-16個(gè)樣本/批次),雖然單個(gè)樣本檢測(cè)時(shí)間較短,但大批量樣本檢測(cè)時(shí),報(bào)告時(shí)間不占優(yōu)勢(shì)(以檢測(cè)90個(gè)樣本為例,16通道檢測(cè)需進(jìn)行至少6批次,2通道檢測(cè)45批次)。
因此,快檢有其特定的適應(yīng)場(chǎng)景,在因特定原因需盡快獲得檢測(cè)結(jié)果、待檢人群數(shù)量較少、實(shí)驗(yàn)室空間場(chǎng)地限制的情況下可以考慮采用。但對(duì)于臨床疑似病例的確診、確診人群(確診病例、出院后以及無(wú)癥狀感染者)的管理、高風(fēng)險(xiǎn)人群的檢測(cè)以及大規(guī)模人群篩查還是推薦使用常規(guī)檢測(cè)。
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